海洋生物1号抑制鼻咽癌细胞株CNE1、CNE-2Z增殖的活性成份的分离纯化和分析.pdfVIP

海洋生物1号抑制鼻咽癌细胞株CNEl、CNE一2Z 增殖的活性成份的分离纯化和分析 中文摘要 【目的】从新鲜海洋生物l号中提取、分离和纯化，得到抑制鼻咽癌细胞株增 殖的活性成份。明确活性物质所在的组份，并纯化、鉴定活性物质，为药物后期 的开发研究提供一定的根据。 【方法】新鲜的海洋生物1号经乙醇冷浸渍法提取，提取液经旋转蒸发，恒温 干燥后得到乙醇粗提物。 1．系统溶剂法对乙醇粗提物进行粗分，即用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正 丁醇作洗脱剂，依次经过快速减压干柱层析分离，得到相应的组份。大孔吸附树 脂HP20层析法对正丁醇组份进一步分离。合并大孔吸附树脂HP20分离的活性 组份，从合并组份中萃取总生物碱，再用低压硅胶柱层析法分离总生物碱。 作用，追踪活性药物所在的组份。 3．薄层层析法展开、分离和鉴定各组份内物质种类。 4．对分离得到的未知生物碱用液相色谱一质谱联用仪分析，得出该物质的 分子量。 【结果】 lI乙醇粗提物经过系统溶剂法分离得3种组份A、B和C，抑制细胞增殖 的活性测定结果显示，3种提取物对鼻咽癌细胞株CNEl、CNE-2Z均有不同程 度的抑制作用，提取物B和提取物C都显示出很强的活性，抑制效果呈时间一 剂量依赖关系。三者抑制率两两比较，差异具有显著性(PO．01)。提取物A、B 163．38ttg／ml和238．421．tg／ml。 C5，药物抑制细胞增殖结果显示，C4和C5对两者细胞系的生长具有显著抑制 作用，并且呈时间一剂量依赖关系。c1、C2和C3对细胞增殖的抑制作用很弱。 IC50值分别为：125．85pe,／n“和91．7ttg／“。 3．从CA、C5合并组份中提取的总生物碱经过低压硅胶柱层析得到DI、D2、 分别为：105．341tg／ml和900．971tg／ml。 4．液相色谱一质谱联用技术分析结果结合薄层层析鉴定结果证明D3生物 碱分子量为234。 【结论】 1．对乙醇粗提物分离的3个组份，提取物B和c都显示出较强的抑制鼻咽 癌细胞株CNEl和CNE-2Z增殖的作用。 2．经大孔吸附树脂HP20分离的C4和c5组份对细胞具有较强的抑制活性。 的抑制作用。 4．D3活性组份中的生物碱分子量为234。 【关键词】海洋生物；CNEI；CNE．2Z；增殖作用；快速减压干柱层析；大孔 吸附树脂HP20层析；硅胶柱层析；总生物碱；质谱 2 and ofBioaetive Extraction，Purification Components Analysis Proliferationfrom NPC—cellLinesCNEIandCNE-2Z Against the ofNo．1Marine Materials Organism and active objectives：To compound extract,segregatepurify a凹instnasopharygeal lines carcinomacell CNEIandCNE-2Z fromNo．1Mflfine proliferation Organism, andalsoto andactivesubstancefmmcertainconcerned identifypurified compounds， usefuldataforfurther thus