C、D型产气荚膜梭菌二价类毒素疫苗及其抗毒素血清的研制.pdf

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2015-11-28 发布于安徽
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C、D型产气荚膜梭菌二价类毒素疫苗及其抗毒素血清的研制.pdf

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课题资助 “畜禽魏氏梭菌菌株筛选与培养技术研究”。横向合作项目，合作单位青岛易邦生物工程有限公司，2014．12．2019．12 “魏氏梭菌病诊断标准”。农业部2014年农业行业标准制定项目，2015．01．2016．12 用与安全控制重点实验室，清华大学。2013．2015 万方数据符号说明万方数据目录中文摘要………………………………………………………………………………………．I 英文摘要………………………………………………………………………………………II 1前言…………．．．…………………………………………………………………………．．．…………．．．…………．．．．．1 1．1产气荚膜梭菌简介………………………………………………………………………．1 1．2C、D型产气荚膜梭菌病的研究…。……………………………………………………2 1．3C、D型产气荚膜梭菌三种主要外毒素生物学研究……………………………：………5 1．3．16【毒素生物学研究………………………………………………………………………．5 1．3．2 p毒素生物学研究………………………………………………………………………5 1．3．2￡毒素生物学研究………………………………………………………………………．．7 1．4产气荚膜梭茵病的流行与疫苗研究……………………………………………………．9 1．4．1产气荚膜梭菌病的流行…………………。……………………………………………9 1．4．2产气荚膜梭菌疫苗的研究进展………………………………………………………10 1．5抗血清研究进展…………………………………………………………………………11 3 1．6研究目的与意义…………………………………………………………………………1 1．7课题技术路线……………………………………………………………………………14 2材料和方法……………………………………………．．…………………………………15 2．1材料…………………………………………………………………………………………………………15 2．1．1菌株及实验动物………………………………………………………………………15 5 2．1．2主要试剂及溶液配制…………………………………………………………………．1 2．1．3主要试验仪器…………………………………………………………………………16 2．2C、D型产气荚膜梭菌接种比例的摸索及毒素的检测………………………………．17 2．2．1 C、D型产气荚膜梭菌菌株的筛选…………………………………………………。17 2．2．1最佳接种比例的摸索…………………………………………………………………17 8 2．2．2外毒素对小鼠半数致死量(LD50)的测定……………………………………………．1 8 2．2．3蛋白毒素保存对毒素致死性的影响…………………………………………………1 2．2．4 SDS．PAGE检测C、D型产气荚膜梭菌外毒素……．．………………………………．19 2．3C、D型产气荚膜梭菌外毒素的灭活及疫苗的制备…………………………………．20 2．3．1外毒素灭活条件摸索及检验…………………………………．．．……………………．20 万方数据 2．3．2氢氧化铝二价苗及白油二价苗的制备………………………………………………20 2．3．3白油类毒素疫苗剂型检测……………………………………………………………．20 2．3．3．1稳定性检查…………………………………………………………………………一20 2．3．3．2白油佐剂类毒素疫苗的粘度检测．．．…………．．…………