IL8、IL12对白色念珠菌SAP2和SAP5表达的影响.pdf

中山大学硕士论文 IL．8、IL一12对白色念珠菌SAP2和SAP5表达的影响 表达的影响 硕士生：荣琼 专业： 口腔临床医学 导师：胡雁教授 中文摘要 albicans,C 白色念珠菌(Candida albicans)是最重要的人类机会致病真菌， 通过三条途径致病：①从酵母相向菌丝相进行形态转化增加粘附和侵入宿主细 胞的能力；②产生与菌丝相关的因子如粘附分子、侵袭素样分子和分泌性水解 酶侵袭宿主细胞；③逃避宿主的免疫应答。分泌性天冬氨酸蛋白酶(secreted aspartyl 家族编码，与白色念珠菌的三条致病途径密切相关。lL．8、IL一12在宿主抗白色 念珠菌感染中具有保护作用，有文献报道Sap可刺激细胞因子产生，增强宿主 的细胞免疫应答能力，然而，细胞因子增加对SAP基因表达的影响有待进一步 研究。 目的 的体外模型；分析念珠菌经牙龈上皮细胞诱导后SAP2、SAP5的表达情况及其 疫治疗提供理论支持和方法指导。 材料和方法 收集30岁以内健康成人志愿者阻生牙拔除术中切取的牙龈进行上皮细胞 培养，一代细胞计数，按2x105／孔接种于12孔板中培养过夜。分别培养SC5314、 中山大学硕士论文 lL一8、lL．12对白色念珠菌SAP2和SAP5表达的影响 3630、3683三株白色念珠菌，计数，按2x106／孔加入上皮细胞孔板中(即白色 念珠菌：上皮细胞=10：1)，调整孔内培养基量至1．5mL。对照组为单独培养 500 000 的白色念珠菌。在共培养的孔中，分别加入IL-8(3pg／mL、7pg／mL)、 IL一12(500 000 pg／mL、1pg／mL)，对照组为不加细胞因子共培养的白色念珠菌。 24 h、48 500 h时收集样本，l r／min离心10分钟，沉淀物贮存于．80℃，荧光定 量PCR检测SAP2、SAP5mRNA的表达量。采用SPSS13．0软件进行统计分析， 义。 结果 1．三株菌株共培养时SAP2、SAP5的表达量显著高于单独培养(PO．01)。 2．3683 SAP2和SAP5的表达量高于SC5314和3630(尸0．05)。 h、48 3．三株菌株与上皮细胞共培养24 h时，SAP5的表达量均显著高于SAP2 (P=-0．000)。 4．IL．8对三株菌株SAP2和SAP5均有抑制作用(PO．05)，48h时几乎可完 全抑制两基因的表达(PO．01)，3500 000 pg／mL和7pg／mL的lL一8之间 没有统计学差异(尸0．05)。 5．在48 h时，500 pg／mL的IL·12可有效抑制三株念珠菌SAP2的表达(尸 O．01)。 结论 1、虽然SAP2和SAP5均是白色念珠菌的致病因子，本研究结果表明后者表达 量明显高于前者，提示SAP5在对口腔上皮细胞侵袭中的作用可能要强于 SAP2。 2、白色念珠菌株3683具有很强的口腔黏膜感染能力，可能与其高表达SAP2 和SAP5有关。 3、lL．8能通过抑制SAP2、SAP5的表达，增强口腔上皮细胞抵御念珠菌的侵 袭；而IL．12仅表现出抑制SAP2的能力。提示两种细胞因子对念珠菌的作 用点可能不同，需要更进一步的研究证实。 关键词 白色念珠菌；牙龈上皮细胞；IL一8／12；SAP基因；荧光定量PCR 中山大学硕士论文 IL．8、lL．12对白色念珠菌SAP2和SAP5表达的影响 SAP5 TheEffectsof 2OilSAP2and