microRNA对多巴胺能神经元分化基因的调节作用.pdf

摘要 摘 要 帕金森氏病(P破inson’sdiseaSe，PD)是由于缓慢发生的中脑黑质多巴胺 能神经元选择性死亡和纹状体多巴胺含量显著减少所导致，PD已成为发病率高 居第二的神经系统退行性疾病。显而易见，多巴胺能神经元(dop锄inergic neuron，DAneuron)数量的锐减导致其所释放的DA递质含量不足，进而引起 运动失调，是PD产生的根本原因。所以，通过合适的途径调控体内DA神经元 的数量，从而恢复神经递质平衡是治疗PD的关键所在。 ，， 可通过与靶mRNA的3UTR区互补配对而在转录后水平负调控基因表达。近期 的众多研究都着眼于此类小分子RNA家族在疾病产生及治疗方面的重要作用。 本文基于现有的研究基础，将三个与多巴胺能神经元分化相关的关键基因 Targets、 息学预测，搜索筛选出对三个靶基因具有调控作用的miRNAs，再经过萤光素酶 双报告基因检测(DuaJ．1uciferase嬲sayssyst咖)和WeStemBl嘣ing对软件预测结 果进行实验验证，结果小结如下： 化密切相关的基因作为研究对象。以这三个基因的3UTR为靶序列，在四款 miRNA数据库中进行生物信息学预测，搜索出可能调控这三个靶序列的 miRNAs。选取四款软件或至少三款软件均能预测到的miRNAs作为候选 1、 miR-206、miR．1 17个miRN舡到T载体中。 miR．30b、miR．384．5p， 3、利用小鼠的胚胎神经干细胞作为转染对象，共转染已构建的候选miRNAs及 携带靶基因3’UTR序列的萤光素酶双报告基因载体。利用Dual。luciferaLseaSsays n 摘要 著的结果外，其他miIⅢAs均与预测结果一致，对靶基因3’UTR具有明显抑制 作用。 AbStract Abstract the selectiVedeathof Parkinson’sdiseaseiscaused slowing dopaminergic by neuronsinthesubstantia the reductionof leVelsinthe nigra，aIldsigniflc锄t dop锄ine hadbc圮omethe striatumofPD incidenceofPD second patiems．The hightest diseaSesin releaSeof neWodegenerativethe、vorld．ObViously，iIlSu维cientdop锄ine the the transimittercallsed decreaseof neurons in by m旬or dop锄inef西c resulting motor amdicalreasonof a to the a嗽ia，is