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IFN-DC分化相关信号通路初探 中文摘要 IFN-DC分化相关信号通路初探 中文摘要 目的：研究JAK-STAT信号转导通路在IFN-α促进及加速单核细胞分化产生高度活 化的、部分成熟的DC（IFN-DC）发生发展过程中所起的作用。 方法：采集正常供体动员的外周造血干细胞（G-PBSC），Ficoll法分离获得单个 + 核细胞，采用磁珠分离获得CD14 单核细胞，根据培养条件的不同分为三组，分别为 + + + CD14 单核细胞 (对照组), CD14 单核细胞+800U/ml GM-CSF(GM-CSF组)和CD14 单 核细胞+1000U/ml IFN-α2b+800U/ml GM-CSF(IFN-α2b+GM-CSF组)。进行如下实验： 1.IFN-α2b+ GM-CSF组和GM-CSF组分别于加入细胞因子0min、10min、30min、1h、 2h、4h 提取总蛋白，通过Western blot实验，观察两组在不同时间点下相关信号蛋白 （JAK1, p-JAK1, STAT1及p-STAT1）的表达情况；并检测IFN-α2b+GM-CSF组和 GM-CSF组分别加入JAK-STAT信号通路阻断剂（AG490）后相关信号蛋白的表达高 + 峰是否减弱；2.以CD14 单核细胞CD80、CD86及CD83的表达水平作为基线水平，分 IFN-α2b+GM-CSF GM-CSF CD 别检测 组和 组各培养三天后上述 分子的表达水平，并检 AG490 CD 测在以上两组分别加入 各培养三天后上述 分子的表达水平。 1.IFN-α2b+GM-CSF IFN-DC DC 结果： 组培养三天后的 表达 较为特征性标志， 包括CD11c、CD86、CD80、HLA-DR 及CD209；CD83为DC的成熟标志之一，在 IFN-DC 上部分表达；同时在浆细胞样树突状细胞（pDC）高表达的CD123，在IFN-DC 亦高表达；培养三天后的细胞形态上可见突起。2.Western blot 检测IFN-α2b+GM-CSF 组在不同时间点相关蛋白表达显示：JAK1和STAT1磷酸化水平在30min 表达达到高 峰，后逐渐减弱。予AG490干预后，JAK1和STAT1磷酸化水平在30min 表达减弱。 同时检测IFN-α2b+GM-CSF 组均加入AG490培养三天后CD80及CD86表达明显下 降，CD83 弱表达。IFN-α2b+GM-CSF 组干预后CD分子表达下降均具有统计学显著 性差异（P0.05）。 结论： 1.IFN-α2b联合GM-CSF 可诱导CD14+单核细胞分化为树突状细胞。 I 中文摘要 IFN-DC 分化相关信号通路初探 。2.JAK-STAT信号通路在IFN-DC 的分化中起着重要的作用。 关键词：树突状细胞； Ⅰ型干扰素；信号通路 作 者：周 华 指导老师：唐晓文 II IFN-DC 分化相关信号通路初探 英文摘要 Studyonsi