人脆性组氨酸三联体（FHIT）基因的克隆及其在HeLa细胞中表达研究.pdfVIP

人脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的克隆及在HeLa细胞中 表达的研究 摘要 脆性组氨酸三联体(ffagjle ／ cloning sire，MCS)中。经脂质体介导，将构建好的表达载体分别转染到HeLa细胞中， 48小时后，在荧光显微镜下可观察到转染细胞发出的绿色荧光。利用G418筛选 结果表明其在转录水平得到表达；利用兔抗人FHIT抗体对转染细胞作免疫细胞 化学分析，DAB显色后观察到胞浆被染成棕褐色，而不表达目的蛋白的对照组中 胞浆不被着色，这一结果说明FHIT基因在HeLa细胞内实现了稳定遗传与表达。 最后，通过对转染细胞凋亡过程中的核DNA断裂端进行标记染色，进一步证明 了缅胞内过表达FHIT基因产物可有效促进细胞凋亡。本研究对进一步了解FIIIT 基因的抑癌作用，及其应用于肿瘤基因治疗的可能性具有重要的理论意义和参考 价值。 关键词：FHlT、脆性位点、基因克隆、脂质体转染、免疫细胞化学、凋亡 CLON矾GoFERAGⅡ．EmST目DDmTRIADGENEAND