《Gankyrin基因沉默对人卵巢癌SKOV3／CDDP细胞顺铂耐药性的逆转作用和机制.》.pdf

中国癌症杂志 2014年第24卷第 1期 CHINA ONCOLOGY 2O14 Vo1．24 No．1 35 Gankyrin基因沉默对人卵巢癌SKOV3／ CDDP~胞顺铂耐药性的逆转作用和 机制 王倩 程垫 天津市水阁医院妇产科 ，天津 300120 [摘要 ] 背景与 目的：卵巢癌是常见的妇科肿瘤，抗肿瘤药耐药性的产生是卵巢癌治疗失败 的 主要原因之一，Gankyrin基 因被认为与肿瘤耐药性密切相关，本文探讨了Gankyrin基因沉默对卵巢癌耐 顺铂细胞系SKOV3／DDPJI~[铂耐药性的逆转作用及机制 。方法 ：应用real—timePCR技术考察Gankyrin在 SKOV3~NSKOV3／DDPfm胞 中的表达 ，应用MTS法检~6ankyrin对SKOV3／DDP细胞顺铂耐受性的影响，应用流 式细胞术检测肿瘤细胞凋亡和细胞 内罗丹明一123(Rhodamine—I23，Rh一123)含量 的变化，Westernblot 和rea卜time PCR技术检测肿瘤细胞耐药相关蛋 白MDR1、Caspase3／8、Survivin*UBc卜2蛋白表达 ， Western b1ot法检~Jlp53、NF—KB和PTEN蛋白表达*UAKT磷酸化水平。结果 ：Gankyrin在SK0V3／DDP细 胞 中表达升高 ，沉默Gankyrin基因后可增加SKOV3／DDP细胞对顺铂 的敏感性。基 因沉默前后耐药逆转 倍数 (resistant factor，RF)为i．81和2．45，肿瘤细胞 中Rh一123含量提高了1．73和2．42倍，细胞凋亡 率是对照组的2．23倍和4．23倍 ，耐药相关蛋 白MDR1、Survivin和Bc卜2蛋白水平显著下降，MDR1mRNA 表达是对照组的62．8％和21．6％，Survivin mRNA表达是对照组的24．5％和i0．3％，Bc卜2mRNA表达是 对照组的47．5％和18．4％，Caspase一3／8、P53和PTEN表达水平上升，AKT磷酸化和NF—KB水平下降。 结论：沉默Gankyrin基因可逆转SKOV3／DDP对顺铂的耐药性，可能与抑制药物外排，促进细胞凋亡有关，PTEN／ AKT／NF—KB／p53信号通路可能是其中心环节。 [关键词 ] Gankyrin基因；卵巢癌；顺铂耐药 DOI：10．3969／j．issn．1007—3969．2014．01．006 中图分类号：R737_31 文献标志码 ：A 文章编号：1007—3639(2014)01．0035．06 Theeffectsand mechanismsofGankyrinsilencingon reversingthecisplatinresistanceofhuman ovariancancerSKOV3／DDPcelllineWANGQian，CHENGKun(DepartmentofGynaecologyand Obstetrics，TianjinShuiGeHospital，Tianjin300120，China) Correspondenceto：WANGQianE—mail：wangqiansgh@126．corn [Abstract] Backgroundandpurpose：Ovariancanceristhecommongynecologicalcancer，andthedrug resistanceofanti—tumordrugwasoneofmajorreasonsfortherapyfailure，somestudiesconsideredthat