《M2-型丙酮酸激酶促进肝癌细胞的侵袭.》.pdf

南京医科大学学报 (自然科学版) 第 34卷第4期 ．410· ACTAUNIVERSITATISMEDICINAuSNANJING(NaturalScience) 2014年 4月 M2一型丙酮酸激酶促进肝癌细胞的侵袭 董天赋 ，柴 浩 ，陈圣林 ，熊新魁 ，孙道一，成 峰 (南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心，江苏 南京 210029) [摘 要] 目的：探讨 M2一型丙酮酸激酶 (pyruvatekinaseM2，PKM2)在肝癌组织中的表达及对肝癌侵袭的影响。方法：荧光定 量PCR (real—timepcR)、免疫组化 (IHc)比较 PKM2在肝癌和癌旁组织中mRNA和蛋白的表达水平；构建人肝癌细胞株 (HepG2)PKM2干扰和过表达的细胞株，分析PKM2对肝癌细胞侵袭的影响；Real—timePCR、免疫组化、Westernblot分析肝癌组 织及转染后的HepG2细胞STAT3的磷酸化、缺氧诱导因子一1c~(hypoxiainduciblefactor—l ．HIF一1)的表达变化。结果：肝癌标 本 (106／115)中PKM2、HIF一1 的mRNA表达水平在肝癌组织中高于癌旁组织，免疫组化显示肝癌组织中的PKM2、HIF．10l的 表达水平高于癌旁组织 ：存体外实验中，干扰 PKM2能抑制肝癌细胞 HepG2的侵袭，过表达PKM2促进肝癌细胞HepG2的侵 袭：PKM2过表达促进 STAT3(signaltransducerandactivatoroftranscription3)的磷酸化．上调HIF1a的表达。结论：PKM2通过 促进STAT3磷酸化，上调HIF一1仅的表达，促进肝癌细胞的侵袭，为肝癌的治疗提供了新思路。 [关键词] M2一型丙酮酸激酶；肝癌 ；肿瘤侵袭 [中图分类号] R735．7 [文献标志码] A [文章编号] 1007—4368(2014)04—410—07 doi：10．7655／NYDXBN PromotionofpyruvatekinaseM2oncellinvasion in livercancercell DongTianfu，ChaiHao，ChenShenglin，XiongXinkui，SunDaoyi，ChengFeng (LiverTransplantationCenter，theFirstAffiliatedHospitalofNJMU，Nanjing210029，China) [Abstract] 0bjective：ToinvestigatetheroleofpyruvatekinaseM2 (PKM2)ontheinvasionoflivercancercellinvitro． Methods：WecomparedmRNAandproteinexpressionsofPKM2inhepatocellularcarcinoma (HCC)tissuesandadjacentnormal tissuesbyreal—timePCR and immunohistochemistry．InterferedandoverexpressedPKM2celllinesofHepG2were constructed to analyzetheroleofPKM2oninvasionoflivercancercells．Real—timePCR，immunohistochemistryandWesternblotwereperfolTnedto investigatetheexpressionofHIF一1 andthephosphorylation ofSTAT3inHepG2cells．Reslllts：ThemRNA expressionsofPKM2 andHIF—ldintheHCCtissues (106／115)werehigherthanthoseinadiacentnormaltissues．Sampleimmunohistoehemistryshowed thattheexpressionsofPKM2andHIF一1 inHCCtissueswerehigherthanthoseinadiacentnormaltissues．n／vitroexperiment． interferenceofP