《MicroRNA-10a通过靶向作用E2F3抑制肝癌细胞的增殖.》.pdf

中国肿瘤生物治疗杂志 http：／／www．biother．org ChinJCancerBiother，Aug．2014，Vo1．21，No．4 · 383 · doi：10．3872／j．issn．1007-385X．2014．04．005 · 基础研 究 · MicroRNA-10a通过靶 向作用 E2F3抑$0,EJT癌细胞的增殖 赵锴 ，王春梅 ，曹雪涛 ’(1．中国医学科学院，北京协和医学院基础医学研究所，北京 100006；2．第二军医大 学免疫学研究所暨医学免疫学国家重点实验室，上海 200433) [摘 要] 目的：探讨微小RNA—lOa(microRNA一10a，miR一10a)对肝癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法 ：收集广西医科 大学附属肿瘤医院肿瘤科2001年 10月至2005年7月144例肝癌患者手术切除的肝癌组织和癌旁组织(距癌灶组织边缘2～ 5em)标本 ，Real—timePCR法分析 144例肝癌组织及癌旁组织中miR．10a的表达量。在肝癌细胞(QGY-7701、Huh7、PCL／PRF／ 5)中转染miR一10a模拟物，Real—timePCR法检测转染后细胞 miR．10a的表达水平；CCK．8法检测过表达 miR一10a的肝癌细胞 的增殖水平，流式细胞术检测过表达 miR一10a的肝癌细胞的凋亡和细胞周期 ；生物信息学预测并以Westernblotting检测过表 达miR一10a的肝癌细胞中转录因子E2F3的表达量。结果 ：与癌旁组织相比，肝癌组织 中的miR．10a显著低表达 [(一9．89± 1．68) (一7．844-1．97)，P=0．000]。转染miR-lOa模拟物后肝癌细胞系中miR．10a的表达量是转染对照小RNA组或空白 组细胞的16倍左右。过表达miR-10a可显著抑制7种肝癌细胞(QGY一7701、QGY．7703、Huh7、PCL／PRF／5、HepG2、BeL-7402、 SMMC-7721)的增殖(均P0．05)，并引起肝癌细胞细胞周期G ／S期阻滞 ，但并不能诱导肝癌细胞发生凋亡。生物信息学预 测显示 E2F3是 miR一10a可能 的靶分子，Westernblotting检测显示过表达 miR一10a可 明显抑制肝癌细胞 中E2F3的表达 [(0．50±0．12)us(0．79±0．21)，P0．05]。结论 ：人肝癌组织 中低表达miR一10a，转染 miR一10a模拟物后多种肝癌细胞的 增殖均受到明显抑制，其机制可能与miR-10a靶向作用转录因子E2F3并阻滞肝癌细胞细胞周期于G／S期有关。 【关键词】 肝癌；微小 RNA-10a；增殖；转录因子 ；E2F3；G。／S期阻滞 [中图分类号] R735．7；R730．2 [文献标志码] A [文章编号] 1007—385X(2014)04-0383-06 M icroRNA-10a inhibits hepatocellular carcinoma cell proliferation through targetingE2F3 ZhaoKai，WangChunmei ，CaoXuetao (1．InstituteofBasicMedicalSciences，ChineseAcademyofMedicalSci— ences，PekingUnionMedicalCollege，Beijing100006，China；2．NationalKeyLaboratoryofMedicalImmunology InstituteofImmunoloyg，SecondMilitaryMedicalUniversity，Shanghai200433，China) [Abstract] Objective：ToinvestigatetheroleofmicroRNA一10a(miR一10a)inhepatocellularcarcinoma(HCC) growth．Methods：PairedHCCandadjacentnon．tumortissuespecimensweresurgicallycollectedfrom 144patientswho werediagnosedwithprimary HCCinGuangxiM