《miR-103通过抑制FBW7的表达促进肝癌细胞增殖.》.pdf

第35卷 第4期 中山大学学报 (医学科学版) Vol_35 No．4 2014年 7月 JOURNALOFSUNYAT．SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) Jn1． 2014 miR一103通过抑制FBW7的表达促进肝癌细胞增殖 李元宏 ，李卫萍 ，任来峰 ，宋维芳 (山西医科大学汾阳学院1．生物化学与分子生物学教研室，2．药理教研室，3．病理生理教研室，山西 汾阳032200) 摘 要：【目的】研究miR一103对肝癌细胞增殖功能的影响及其作用机制。方【法】RealtimePCR方法检测miR～103在 肝癌组织和细胞中的表达。将miR一103inhibitor转染到肝癌细胞 中，分为实验组 (转染 miR一103inhibitor)和对照组 (转染 NegativeContro1)，通过MTr实验检测肝癌细胞的增殖变化。RealtimePCR和Westernblotting检测转染miR一103mimics后肝 癌细胞中FBW7mRNA和蛋白的表达变化。通过重荧光素酶报告基因实验检测转染 miR一103mimics或inhibitor后 FBW7—3’ UTR活性的变化。【结果】RealtimePCR结果显示miR一103在肝癌组织和HepG2细胞系中均高于癌旁组织和L02肝细胞系 (P0．05)。M．】I1实验结果显示 ，转染miR一103inhibitor实验组肝癌细胞的存活细胞数低于对照组 ，差异有统计学意义 (P 0．05)。RealtimePCR和Westernblotting结果显示 ，转染 miR一103mimics实验组肝癌细胞中FBw7的mRNA和蛋白表达水 平都低于对照组．重荧光素酶报告基因实验结果显示 ，与对照组相 比，转染miR一103mimics的实验组中FBW7—3’UTR报告 基因活性显著降低(P0．05)；与对照组相比，转染 miR一103inhibitor的实验组中FBW7—3’UTR活性显著升高(P0．05)。进 一 步实验发现，转染FBW7后能显著下调由miR一103mimics所引起的细胞增殖作用。【结论】miR一103可以通过抑制FBW7 的表达来促进肝癌细胞增殖。 关键词：miR一103；肝癌；增殖；FBW7 中图分类号：R735 文献标志码：A 文章编号：1672—3554(2014)04—0500—06 miR-103PromotesHepatomaCellProliferationThroughInhibitingFBW 7 LIYuan-hong，LIW ei—ping2，RENLai—feng，SONGWei—fang。 (1．DepartmentofBiochemistryandMolecularBiology，FenyangCollegeofShanxiMedicalUniversity，Fenyang032200，China； 2．DepartmentofPharmacoloyg ，FenyangCollegeofShanxiMedicalUniversity，Fenyang032200，China；3．Departmentof Pathophysiology，FenyangCollegeofShanxiMedicalUniversity，Fenyang032200，China) Abstract：O【bjective】ToinvestigatetheeffectofmiR一103onproliferationofhepatomacellsanditsmechanism．M【ethods】The expressionofmiR一103wasdetectedinhepatomatissuesandcellsbyreal—timePCR．TheeffectofmiR一103inhibitoronproliferationof hepatomacellswasmeasuredusingMTFassay．ThemRNA andproteinlevelsofFBW7weremeasuredbyrealtimePCR andWeste