《miR-148a对肝癌细胞株侵袭和迁移的抑制作用及机制.》.pdf

中国癌症杂志 2014年第24卷第6期 412 CHINA 0NCOLOGY 2014 Vo1．24 No．6 miR一148a对肝癌细胞株 侵袭和迁移的抑制作用及机制 贾筱琴 缪俊俊 雍军 张子兰 花晨 李国利 扬州大学医学院病理学教研室，江苏扬州 225009 【摘要] 背景与 目的：原发性肝癌是肝细胞或肝内胆管上皮发生的恶性肿瘤，其复发和转移十分常见。 本实验以慢病毒介导miR-148a，感染人肝癌s删c一7721细胞，观察其对s~fMC～7721细胞侵袭和迁移能力的影响。方 法 ：选用SMMC一7721肝癌细胞株，进行miR一148a慢病毒载体的构建，筛选稳定表达miR～148a肝癌细胞株。RT— PCR检测细胞中miR～148a的表达水平。划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞侵袭迁移能力。采用明胶酶谱 法测定MMP一2、ICNP一9的活性 。蛋白质印迹法 (Westernblot)检测MMP一2、MMP～9~1EMT相关蛋白(E-cadherin、 vimentin)的表达情况。结果：RT-PCR结果显示，和对照组相 比，LV—miR一148a肝癌细胞感染组表达miR一148a明 显增高，体外侵袭实验细胞划痕实验显示过表达miR～148a后SMMC一7721的侵袭和迁移能力明显下降。明胶酶谱 法结果显示过表达miR一148a的肝癌细胞，MMP一2和MMP～9降解明胶的能力下降(PO．05)。过表达miR～148a同时能 降低肝癌细胞SMMC-7721中vimentin、MMP一2和MMP一9蛋 白的表达，但并未影响E—cadherin的表达。结论：miR一 148a在体外能抑制肝癌细胞SMMC一7721的侵袭和迁移，其机制可能与下调MMP一2、MMP一95~vimentin的表达水平 有关。 [关键词] miR-148a；肝细胞癌；侵袭；迁移；MMP一2；MMP一9 DOI：10．3969／j．issn．1007—3969．2014．06．003 中图分类号：R735．7 文献标志码：A 文章编号：1007—3639(2014)06—0412—06 Inhibitionoftheinvasionandm igrationOfhepatOcellularcarcinomacellsbym iR-148aandthe mechanismsJIAXiao—qin，MIAOJun-jun，YONGJun，ZHANGZi—lan，HUAChen，LIGuo—li(Department ofPathology,MedicalCollegeofYangzhouUniversity,YangzhouJiangsu225009，China) Correspondenceto：LIGuo—liE．mail：miaoyzu@sina．corn [Abstract] Backgroundandpurpose：Primarylivercanceristhemalignanttumoroflivercellsor intrahepaticbileductepithelium withfamiliarmetastasisandpostsurgicalrecurrence．Thepurposeofthisstudywasto investigatetheeffectsofmiR．148aontheinvasionandmigrationofhepatocellularcarcinomacellsandtheunderlying mechanisms．M ethods：ThesupernatantcontainingLV_miR．148alentivirusparticleswasusedtoinfectSMMC一 7721cells．Theex