选一53血红蛋白的提取和分离.ppt

课题3 血红蛋白的提取和分离 主要内容： 一、基础知识 二、实验操作 一、基础知识---蛋白质分离和提取的原理 ㈠ 凝胶色谱法（分配色谱法） 1、凝胶： 一些微小多孔的球体（内含许多贯穿的通道，由多糖类构成如葡聚糖、琼脂糖） 2、概念： 根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法 3、原理： 分子量 大 小 直径大小 大于凝胶颗粒空隙直径，被阻挡在颗粒的外面 小于凝胶颗粒空隙直径，可以进入颗粒内部 运动方式 垂直向下移动 垂直向下移动，无规则扩散进入颗粒内部 运动速度 较快 较慢 运动路径 较短 较长 洗脱次序 先从凝胶柱洗脱出来 后从凝胶柱洗脱出来 一、基础知识---蛋白质分离和提取的原理 4、具体过程 一、基础知识---蛋白质分离和提取的原理 1、概念：在一定的范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液PH发生明显变化的作用叫做缓冲作用，具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。 ㈡ 缓冲溶液： 2、作用： 能够抵制（ ）对溶液（ ）的影响，维持PH基本不变。 外界的酸或碱 pH值 3、缓冲溶液的配制 通常由（ ）种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的（ ）就可以制得（ ）使用的缓冲液。 1－2 使用比例 在不同PH范围内 思考：说出人