稀有放线菌筛选及新种鉴定.pdf

摘要 摘要 随着不断开发和利用放线菌资源，稀有放线菌逐渐成为产生抗生素的良好来源，很多研 究者把目光转向了稀有放线菌分离上。本实验旨在从土壤中筛选出对多种植物病原真菌及细 菌有抑制作用的稀有放线菌，对菌株发酵液粗提物进行抑菌活性测定，以寻找产生新抗生素 的菌种来源，并对形态特别的菌株进行鉴定。 本实验采用3种分离培养基(添加荼啶酮酸20mg／L和放线菌酮50 mgrL)，分别为GYEA 培养基、LSV-SVF培养基及HV培养基。采用5种不同筛选：亨法对取自黑龙江省、内蒙古、 广东省等共9份土样进行筛选分离，共分离得到102株放线菌。采用管碟法测定放线菌的发 酵液粗提物进行抑细菌活性，实验得到有16株菌藤黄微球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径大 于15mm，其中4株菌对以上两种细菌的抑菌圈直径均在大于25 mm，分别为NI(1)、N20)、 M2马和A1，且其中有3株菌对藤黄微球菌的抑菌圈高达30 A1；采用十字交叉法对102株放线菌进行了抑制6种真菌实验，实验得到27株菌至少对2 H3小、M2马、Al和A4。 采用小单孢菌分离方法得到的6株与小单孢菌科描述极为相似的菌株，它们分别为菌株 M2、C2‘、N1、G2、1．15和L5，我们对其进行16SrRNA测序，将测序结果与GenBank中的 16S ehokoriens趣strain2．1 chokoriensisstrain Mieromonospora 9(6)T，其中与Micromonospora 培养基上的菌落形态却是明显不同的，由此初步推断这4株菌可能是不同种。菌株L5与小 单孢菌科己发表的菌种16SrRNA序列相似性相对较低，其同相似性最高菌株分别为 MK-70T Micromonosporaolivasterospora0838％)，Jishengellaendophytica202201T(98．35％)， T 21101 FXJ6．011 Micromonosporarhizosphaerae8T(98．1l％、，Micromonosporayangpuensis MK．70 1在系统 (98．04％)。但菌株L5与其相似性最高的菌种Micromonosporaolivasterospora 202201 1。在同一分支上，由此 发育树上并不在同一分支上，而与新属Jishengellaendophytica 初步推断菌株L5有可能是JishengelIaendophytica属中的新种或者是一个新属。本实验对L5 的表型及生理生化水平进行了鉴定，后继实验还需对其进行化!学分类学及分子生物学鉴定。 关键词抑菌活性；稀有放线菌；小单孢菌；新种 Abstract Rare andIdentificationofA Isolation。ofActinomyces Nov．el Actinomy7ce Abstract With thecontinuous anduseof