选择复制型腺病毒SG500介导突变型Dm-dNK基因治疗乳腺癌及研究.pdfVIP

·中文论著摘要· 治疗乳腺癌的研究 目 的 乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤，根据近年的统计，美国女性新发肿瘤中，乳 腺癌占据首位。在发达国家其发病率随着年龄的增长而增加。在过去十年里中国 的乳腺癌发病率稳步增加且更年轻。目前外科切除或联合系统化疗对乳腺癌患者 是有效的，但效果并不满意。化疗是肿瘤综合疗法的方法之一，广泛用于术前、 术中及术后。当乳腺癌发生转移时其治疗特别困难。恶性肿瘤的基因治疗是一种 M00lten 有可能根治恶性肿瘤而不损伤正常组织的特殊治疗手段。1986年Frederid 首次描述了自杀基因疗法，现在己发展为重要的且最具潜力的肿瘤新兴治疗方法 之一。通过rA越，门限E／HSV-T剐GCv／DOx阿霉素系统联合化疗药物治疗乳腺癌 体内外实验结果显示，这种带有靶向TRE(tetracycline．responsiveelement)启动子 的载体系统联合适当的化疗比单用其中任何一种疗法的疗效更好，自杀基因可能 对乳腺癌产生很好的杀伤效果。 在自杀基因疗法中，将某些病毒、细菌中特有的前药物转换酶基因一通过病 毒等载体导入肿瘤细胞，自杀基因编码的特异性酶类将无毒的药物前体在肿瘤细 胞内代谢成毒性产物达到杀死肿瘤细胞的目的。目前基因治疗系统有多种，应用 于实体肿瘤治疗研究较多的有：单纯疱疹病毒1型胸腺嘧啶激酶／戊环鸟苷 水痘．带状 (HSv．T刈GCV)系统、细菌胞嘧啶脱氨酶／5．氟胞嘧啶(CD／5．FC)系统、 疹病毒1型胸腺嘧啶激酶／戊环鸟苷饵SV．T刚GCv)系统目前应用较为广泛。GCv 本身无毒性，是一种核苷酸类似物，在TK作用下形成GCV单磷酸盐(GCV．MP)， 然后在细胞内再转化为三磷酸盐(GCV．TP)的形式，作为链终止剂，阻止单链DNA 延长，使细胞周期停滞在S期，抑制细胞分裂并使其死亡，GCV．TP对增殖中的哺 乳细胞具有高度毒性。哺乳动物细胞自身的胸腺嘧啶激酶可以催化GCV的转化， 而HSV．TK的作用更强，超过前者200倍。自杀基因对包括肝癌、乳腺癌、大肠癌、 黑色素瘤、胰腺癌、脑胶质瘤及卵巢癌的治疗效率己被许多肿瘤的细胞实验和动 物实验证实。尽管自杀基因的治疗效果在基础实验中被肯定，但在临床上的应用 仍存在杀伤效率有限及安全使用问题。从临床应用安全角度考虑，理想的肿瘤自 杀基因治疗即要有效性，又要安全性，而安全性的关键在于其真正做到靶向性表 达，从而杀灭肿瘤细胞，又使正常组织免于受到损伤。E1B55Kda蛋白和p53蛋白 调控腺病毒在宿主细胞中的复制，其主要机制是病毒在宿主细胞的复制被p53蛋白 55K蛋白抑制，从而使腺病毒的复制能够在宿主细胞 抑制，而宿主细胞p53被E1B 55K基 中顺利进行。具有靶向瘤裂解功能的腺病毒0NYX．015(d11520)是一种E1B 因缺失的腺病毒，由于不能表达E1B 55Kda蛋白，从而使p53蛋白功能不能被抑制， 因此在p53功能正常的细胞中不能复制，但在p53功能缺陷的肿瘤细胞中其可以复 制。因此理想载体的选择对治疗基因能否安全、高效地导入肿瘤细胞是肿瘤基因 治疗成功极为重要的一环。 reverse telomeraSe 人端粒酶逆转录酶(humall 胞永生化过程中具有端粒酶活性的细胞中，绝大多数人恶性肿瘤细胞中端粒酶活 element，HI迮)启动子 化而正常体细胞检测不到。缺氧反应元件(hypoxiaresponse 的活化是实体肿瘤特异性的改变，可以使得外源基因在肿瘤细胞内表达，而在正 常细胞内表达量极微，据此可以作为肿瘤特异性的靶向启动子。 选择复制型腺病毒SG500中早期转录单位E1A和E1B区之前分别加上了