活性污泥在适应不同污水处理过程中微生物群落及其功能的进化的研究.pdf

摘要 本研究在摇瓶和连续运行反应器两种体系条件下，利用454高通量测序、定量PCR 以及功能基因克隆和序列测定等技术分析研究了城市污水处理厂活性污泥在适应印染 废水和造纸废水过程中微生物群落组成和功能的演化过程，取得如下创新性结果： (1)城市污水厂中的活性污泥在摇瓶条件下对印染废水和造纸废水的处理结果。在 摇瓶条件下，将城市污水处理厂活性污泥分别接种到造纸和印染废水中，分别经过41 140 天和S5天的驯化培养，造纸废水在处理周期为12h，进水COD和色度为9i6．1m玑、 80．128倍的条件下，出水COD、色度分别为96．295 mgm、16．32倍，COD、色度去除 为2360．3510 mgm、128．200倍条件下，出水COD和色度分别为356．2680 mgm和32．160 倍，COD和色度去除率分别为20．2％．91．1％、10．75％； (2)城市污水厂中的活性污泥在摇瓶条件下适应印染废水和造纸废水过程中微生物 印染废水及城市污水处理体系中微生物丰度的变化，结果表明，三个系统中微生物总数 达到3．4x1013 8．9×1014个／g干污泥，其中细菌数量为4．38x10131．68x1015个／g干污泥，真 菌数量为3．8x10‘-4．6x109个儋干污泥，三个系统中真菌与细菌的比例都是随着反应体系 的运行逐渐降低。454高通量测序结果表明在三种废水处理体系中的优势细菌主要分布 城市污水活性污泥中优势细菌类群为变形菌门(37．4％)，其中Q一亚纲比例达到61．32％； 城市污水活性污泥适应不同的工业废水过程中，微生物组成发生了明显变化，适应印染 废水后，优势菌群仍为变形菌门(69．6％)，其中0【一亚纲比例达到92．9％；适应造纸废水 之后，优势菌群为厚壁菌门(56．4％)，其中芽孢杆菌纲比例高达98．5％。 (3)生物活性碳反应器连续运行条件下对造纸废水的深度处理研究。分别构建了 7．1L的活性炭反应器、活性污泥负载活性炭反应器和混合酵母菌负载活性炭反应器进行 造纸废水常规物化处理后的出水的深度处理系统。经过245天连续处理，结果表明，在 水力停留时间为12．16h，进水COD和色度分别为363-454 mg／L、120．160倍的条件下， 分别为32．1．66．7％、73．86．7％。运行50天之后，生物活性碳反应器的处理效果明显高 于纯活性炭，酵母菌负载活性炭反应器对造纸废水的处理效果最佳，系统稳定时的COD 去除率在66％左右，活性污泥负载活性炭反应器在系统稳定时的COD去除率维持在 52％，而纯活性炭反应器在系统稳定时的COD去除率仅维持在“％。 (4)生物活性炭反应器对造纸废水连续深度处理条件下功能微生物群落的进化研 究。分别对三种反应器不同运行时期取样进行定量PCR分析微生物群落结构，结果表 性炭，在所有反应器中的不同运行时期细菌始终占据优势地位，真菌次之；真菌与细菌 的比例在酵母菌负载活性炭反应器中明显高于另外两种反应器，但其随着反应的运行逐 渐降低。对PAH双加氧酶功能基因的定量检测结果表明：在三种反应器中，该基因在活 性污泥负载活性炭反应器中含量最高，革兰氏阳性菌PAn双加氧酶基因丰度略高于革兰 氏阴性茵；这些功能基因的丰度在种污泥中较高，其在活性污泥负载活性炭反应器中随 着系统运行，含量逐渐下降，但至系统稳定至180天时，其丰度逐渐升高，甚至超过种 泥。每个反应器样品中分别挑取50个克隆进行PAH双加氧酶基因的多样性分析，结果 表明，各反应器中该基因的多样性差别不显著，革兰氏阳性PAH双加氧酶酶基因主要 (Staphylococcus)等。 关键词：典型工业废水，生物活性炭，454高通量测序，Q．PCR，微生物群落进化，降 解PAH功能基因 II ABSTRACT In this evolutionofthemicrobial in