菌种的来源节.pptVIP

细菌（bacteria）：枯草芽孢杆菌、醋酸杆菌、棒状杆菌、短杆菌等。 霉菌（mould）：喜偏酸性环境。可用于生产多种酶制剂、抗生素、有机酸及甾体激素等。 放线菌（actionmycetes）：原核微生物类群。在含有机质丰富的微碱性土壤中分布较为广泛。主要用于生产多种抗生素。 担子菌（basidiomycetes）：主要用于多糖、橡胶物质和抗癌药物的开发。 藻类（alga）：许多国家已把它作为人类保健食品和饲料。还可通过藻类将CO2转变为石油；国外还有从“藻类农场”获得氢能的报道。 2.1.3 工业生产对微生物菌种的要求 2.2 生物物质产生菌的筛选 新的微生物菌种需要从自然生态环境中混杂的微生物群中挑选出来，因此必须要有快速而准确的新种分离和筛选方法。 2.2.1 微生物－生物产物的来源 2.2.2 待筛选样品的性质 固体或液体培养基 随培养方式的不同，次级代谢产物有所不同，以液体培养法为主。 2.2.3 活性物质筛选方案的设计 整体生物 完整细胞 亚细胞制剂 2.3 微生物选择性分离的原理和发展 1）含微生物材料的选择 2）材料的预处理 3）所需菌种的分离 4）培养 5）菌落的选择和纯化 2.3.2 材料的预处理 材料的处理方法 2.3.3 菌种的分离 1）培养基的养分； 2）pH； 3）加入的选择性抑制剂。 1）分离放线菌的主要培养基 大多数放线菌是微嗜中性的，分离培养基的pH常在6.7～7.5之间。如要分离嗜酸放线菌，pH宜降低到4.5～5.0。 3）选择性抑制剂（抗生素） 2.3.4 菌种的培养 放线菌：25～30℃ 嗜热菌：45～55℃ 嗜冷菌： 4～10℃ 分离嗜温菌(链霉菌和小单孢菌)：7～14d 分离嗜热菌（高温放线菌）：1～2d 2.3.5 菌落的选择 铺菌法：于分离平板上铺上一层单一的试验菌的办法可用来测定各个菌落的抗生素生产能力。 复印平板法：将菌落复印在平板上的办法来研究它们对一系列试验菌的作用。 铺菌法会使所需要的菌落污染，且只能在每个平板上铺上一种试验菌。 复印平板法对不长孢子的链霉菌不能使用，也不适用于游动细菌的筛选。 2.4 工业微生物的分离 重要指标： 1）菌的营养特征； 2）菌的生长温度应选择高于40℃的菌种； 3）菌对所采用的设备和生产过程的适应性； 4）菌的稳定性； 5）菌的产物得率及其在培养液中的浓度； 6）容易从培养液中回收产物。 2.4.1 施加选择性压力分离法 3）固体培养基的使用 常用于分离某些酶产生菌 分离碱性蛋白酶产生菌 2.4.2 随机分离方法 高产培养基成分的选择准则： 制备一系列的培养基，其中有各种类型的养分成为生长限制因素（C、N、P、O）； 使用一聚合或复合形式的生长限制养分； 避免使用容易同化的碳（葡萄糖）或氮（NH4+），它们可能引起分解代谢物阻遏； 确定含有所需的辅因子(Co2+,Mg2+,Mn2+,Fe2+) 加入缓冲溶液以减小pH变化。 1)生长因子产生菌的筛选 (2)抗生素生产菌的分离 把潜在的产生菌生长在含有试验菌的平板上 将微生物分离株生长在液体培养基中 联合试验菌筛选：如黄色霉素抗生素就是用枯草杆菌和绿色产色链霉菌或巴氏梭状芽孢杆菌筛选出的。 利用与抗生素作用机制相关的酶筛选：如棒酸。 2.5 已工业化产品生产菌的介绍 2.5.1 抗生素生产有关的微生物 2.5.2 氨基酸生产有关的微生物 50,60年代以氨基酸发酵为代表的代谢控制发酵，是发酵工业发展历史上的一个转折点。 氨基酸生产菌的要求： 2.5.3 与食品酶制剂生产有关的微生物 开发一个新酶都要经过一系列毒理试验的研究。关于食品用酶，美国需要得到FDA的批准。目前仅同意使用少数几种微生物能用于生产食品用酶。 2.6 工业微生物菌种的衰退、复壮与保藏 微生物菌种的衰退 菌种的复壮 菌种的保藏 2.6.1 菌种的衰退 异核现象导致微生物群体发生变异 菌种生理状态的改变： 菌种培养基营养过于丰富不利于孢子形成，影响发酵；菌种培养基营养贫乏，菌种在营养贫乏的培养基中多次传代会使菌体细胞内缺乏某些生长因子而衰退甚至死亡。 培养基应选择具有传代后生产能力不发生明显下降、菌落不易衰老和自溶的正常形态菌落，孢子丰富的培养基。 2.6.2 菌种的复壮 纯种分离 通过寄主体进行复壮 淘汰已衰退的个体 2.6.3 菌种的保藏 菌种的保藏方法： 适合于产孢子或芽孢的微生物。是国内常采用的一种方法。 将斜面孢子制成孢子悬浮液接入沙土管中或将斜面孢子刮下直接与121℃间歇灭菌三次的沙土混合（沙与土的比例为l－2∶l ），于干燥器中用真空泵抽干，放在冰箱内保存。一般保存期为1年左右。 向培养成熟的菌种斜面上，倒入一层