蛋白质第一周.ppt

生物化学与药学科学 生物化学 第一章 蛋白质化学 学习要点 1、了解蛋白质的元素组成、分类和功能，掌握蛋白质常见氨基酸的种类、名称、符号、结构和性质，了解氨基酸准备方法、掌握分离分析鉴定的技术原理。 2、重点掌握蛋白质的理化性质、电化学性质、胶体性质、两性性质、沉淀和复性。 3、难点是蛋白质的空间结构、掌握一级结构分析测定的方法，肽平面的概念，二、三级结构模型的要点，了解四级结构的基本概念。 4、了解蛋白质分离、纯化的方法，掌握蛋白质分离分析鉴定的技术原理。 第一节 概述 一、蛋白质的概念 1、重要性——蛋白质是生命的物质基础 蛋白质是生物 体重要组成成分(细菌和病毒) 2、元素组成——蛋白质是含氮元素恒定的生命物质 蛋白质的元素组成：C、H、O、N（16％）、(S、P、Cu、Mn、Mo、Co、Zn、Mg、Ca) 每克样品中蛋白质的含量 ( g % ) = 每克样品含氮克数/16%=含氮克数× 6.25 二、蛋白质的分类 1、依据蛋白质的外形分类 球状蛋白质 纤维状蛋白质 2、依据蛋白质分子的化学组成： 简单蛋白质 结合蛋白质 再分别根据溶解性质和辅基成分分为若干小类。 结合蛋白质＝蛋白质部分＋非蛋白质部分（辅基） 三、蛋白质的生物学功能 1、催化功能：如酶 2、调节功能：蛋白质和多肽，胰岛素、促激素、肾上腺皮质激素 3、免疫保护作用 4、转运和贮存作用 5、运动与支持作用 6、控制生长和分化作用 7、接受和传递信息的作用 8、生物膜的功能 蛋白质的基本结构单位──氨基酸 一、氨基酸的通式 二、氨基酸的分类 三、二十种常见的蛋白质氨基酸分类、结构及三字 符号 四、氨基酸的性质 一 氨基酸的通式 ----C-C-C-C-COOH γβα （与官能团相连的第一个碳叫α，第二个叫β，第三个叫γ ） ----C-C-C-C(NH2)-COOH α-氨基酸 ----C-C-C(NH2)-C-COOH β-氨基酸 ----C-C(NH2)-C-C-COOH γ-氨基酸 蛋白质氨基酸： 蛋白质中常见的20种氨基酸 稀有的蛋白质氨基酸：蛋白质组成中，除上述20种常见氨基酸外，从少数蛋白质中还分离出一些稀有氨基酸，它们都是相应常见氨基酸的衍生物。如4-羟脯氨酸、5-羟赖氨酸等。 非蛋白质氨基酸：生物体内呈游离或结合态的氨（氨基丁酸、鸟氨酸和瓜氨酸） 中性脂肪族氨基酸 酸性氨基酸及酰胺 碱性氨基酸 杂环氨基酸 芳香族氨基酸 二十种常见蛋白质氨基酸的分类、结构及三字符号 非极性R基团氨基酸 不带电荷极性R基团氨基酸 带电荷R基团氨基酸 四 氨基酸的理化性质 物理性质： (1) α-氨基酸为无色晶体，熔点极高，一般在200℃以上。 (2) α-氨基酸具有极性基团，一般可溶于水； (3) 除甘氨酸外，所有天然氨基酸分子，含有不对称碳，具有旋光性。 （4）参与蛋白质组成的20种氨基酸中色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)的R基团中含有苯环共轭双键系统，在紫外光区（220-300nm）显示特征的吸收谱带，最大光吸收（max）分别为279、278和259nm。由于大多数蛋白质都含有这些氨基酸残基，因此用紫外分光光度法可测定蛋白质含量。 紫外吸收性质Trp，Tyr，Phe的 紫外吸收光谱 氨基酸的化学性质 （1）两性解离和等电点 （2）重要化学反应 a. 与茚三酮反应:用于氨基酸定量定性测定. b.与2,4一二硝基氟苯(DNFB)的反应（sanger反应）:用于蛋白质N-端测定. c. 与苯异硫氰酯（PITC）的反应（Edman反应），用于蛋白N-端测定，蛋白质顺序测定仪设计原理的依据。 d.与二甲氨基奈磺酰氯法的反应（DNS-Cl）：DNS具有强烈的荧光，DNS氨基酸可不用提取直接测定。 （1）氨基酸的两性解离性质及等电点  氨基酸等电点的计算 （2） 化学性质-1 氨基酸与茚三酮反应 化学性质-2 氨基酸与DNFB的反应 化学性质-3 氨基酸与苯异硫氰酯（PITC）的反应（Edman反应） 第三节 肽 肽键：一个氨基酸的a-羧基和另外一个氨基酸的a-氨基脱水缩合 氨基酸之间脱水后形成的键称为肽键，又称酰胺键。 多肽：由多个肽键形成的化合物称为多肽。二肽缩合叫做二肽。 肽平面：参与肽键的六个原子C、H、O、N、C1、C2不能自由 转动，位于同一平面，此平面就是肽平面，也叫酰胺平面，也是一个肽单位。 肽单位