脑缺血再灌注后缺血边缘区NG-%2c2-表达及研究.pdf

摘 要 目 的：随着脑功能研究的深入，越来越多的研究者研究领域从神经元转向胶质细胞，从生理情况转 向病理状态。本研究观察脑缺血再灌注后缺血边缘区海马和皮层NG2 的动态表达，探讨其表达变化 在脑缺血再灌注损伤后的神经损伤与修复过程中所起的作用。 方 法：制备大鼠局灶性大脑中动脉阻塞再灌流（MCAO ）模型，清洁级wistar 雄性大鼠45 只，体 重200-250g ，随机分为假手术组（Sham）和脑缺血再灌注（MCAO ）组，脑缺血再灌注组采用线栓 法制备大鼠大脑中动脉阻塞再灌流模型，假手术组不插入线栓。术后 3d、7d、30d 处死大鼠，采用 TTC 染色法观察脑缺血后梗死灶；用尼氏染色法观察脑缺血后大鼠海马神经元的变化；免疫组织化 学法和共聚焦显微镜成像观察sham 组及脑缺血后3d、7d、30d 不同时间点缺血侧的海马CA1 区和 缺血边缘区NG2 的动态表达情况，采用NIH 图像处理系统进行图像分析。各只动物随机抽取5 个不 x 相重复的 200x 视野图片测量NG2 的光密度值。所得数据用均数±标准误（ ±SEM ）表示，统计处 理应用 SPSS11.5 软件包，各实验组数据的比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA)，继以LSD 进行两组间差异性检验。 结 果：1.TTC 染色观察到缺血灶，线栓法制作的脑缺血再灌注模型有稳定的梗塞灶。2.尼氏染色观 察到脑缺血再灌注后神经元丢失。3.免疫组织化学法观察到：（1）缺血后海马CA1 区NG2 的表达 变化：正常组 NG2 在海马区有表达，缺血后 3d NG2 表达增强，但与 Sham 组相比无统计学意义 （P0.05 ），缺血后7d NG 荧光强度较对照组也明显增强（P0.01 ），缺血后30d NG 表达相对Sham 2 2 组仍显著增强（P0.01 ）,但低于缺血后7d 组（P0.05 ）。（2 ）缺血后皮层区NG2 的表达变化：正 常组NG2 在皮层区有表达，缺血后3d、7d、30d 与Sham 组相比NG2 均表达增强（P0.01 ），与缺 血后3d、30d 相比，缺血后7d NG2 的表达明显增强（P0.01 ）。 结 论：脑缺血缺血边缘区NG 阳性细胞数目的增加可能与脑缺血后损伤修复密切相关。 2 关键词：脑缺血；缺血边缘区；NG2 论文类型：A(基础研究） I Abstract Objective: To observe the temporal expression of NG in ipsilateral Hippocampus and cortex in rats after 2 middle cerebral artery occlusion (MCAO) and to explore its role in the neuronal damage and repair after ischemia. Methods: Adult male Wistar rats weighing 200–250 g (n =45) were used for the experiments and were randomly divided into transient middle cerebral artery occlusion (MCAO) group (n=30) and sham-operated group (n=15).All the experiments were conducted according to protocols approved Tongji medical College Animal Care Committee. The rats in MCAO group were subjected to