金针菇AEC抗性突变株筛选.pdfVIP

中文摘要 [目的] 提高农作物中人体与哺乳动物必需氨基酸含量是育种工作的主要研究领域，8 种必需氨基酸中的赖氨酸、苏氮酸、甲硫氨酸和异亮氨酸皆以天冬氨酸为共同前体，通过 不同的支路来代谢合成，其中祯氮酸还通常是影响氨基酸品质的第一限制性氨基酸，赖氨 酸结构类似物S一(2一氨基乙基j一2’半胱氨酸(AEC)在天冬氨酸旗代谢途径和含量提高的 研究中起着重要作用。本研究首先观察AEC对6种食用菌菌丝生长的影响，探讨其与6种 食用菌氢基酸含量的相关性及食用菌间氮基酸代谢的异同，在此基础上．以金针菇单核菌 丝产生的粉孢子为材料，通过萦外线诱变．以AEC为选择培养基筛选具有AEC抗性的金针 菇突变菌株，并测定突变株与出发菌株氮基酸含量，分析金针菇等食用菌天冬氮酸族氨基 酸含量进一步提高的可能性，为食用菌氨基酸品质改良奠定理论与实验基础。 [方法] l、配制含有不同AEC浓度的基本和完全培养基上，接种金针菇单核菌丝(IM02)， 培养观察AEC对菌丝生长的抑剖情况．并与AEC对白色茶树菇，榆黄蘑，虎奶菇，杏鲍菇 2、观察紫外线和co”辐射 和姬松茸抑制作用进行比较，昔算AEC对菌丝生长抑制的Icm 对金针菇粉孢子致死效应；3、利用AEC选择培养基，筛选出经紫外线诱变，具有AEC抗 睦的金针菇单核菌株，纯化后氧抗性的稳定性试验，井通过液体发酵比较抗性菌株和出发 菌株菌丝体游离氨基酸和总氢基酸的含量。4、将出发菌株IM02、抗性菌株与金针菇单核 苗丝IS02杂交。通过观察有无锁状联合来鉴定菌株。 1、AEC浓度在30001以上，金针菇单核菌丝的生长被完全抑制；在基本培 [结果] 19．L 养基上，AEC对金针菇单核菌丝(IE02)，白色茶树菇，榆黄蘑，虎奶菇，杏鲍菇和姬松 茸的半数抑制浓度分别为24．s，5754．I，159．4，2I．7，1158．8和361．8 mg．L。。：在完全培 养基上，AEC对金针菇单核菌兰(IM02)，白色茶树菇，榆黄蘑，虎奶菇和杏鲍菇的半数 抑制浓度分别为2792．3．379751．1，402．2，244．9和1576．7mg．一，具有显著的不同：2、 紫外线和co”对金针菇草核菡丝产生粉孢子致死效应分剐较符合二次方程 筛选到一株AEc抗性稳定的突变株A1。氨基酸测定表明，突变株Al在基础培养基发酵的 菌丝体游离的异亮氨酸、苏氨酸和天冬氮酸族氨基酸总量分别比出发菌株IM02提高了 49．4％、i1．1％和17．砩；在完全培养基发酵的菌丝体的游离氨基酸总含量提高了38．3％． 8％、 其中，异亮氮酸、甲硫氨酸、苏氮酸、赖氨酸和天冬氮酸族氨基酸总量分别提高了78 单核菌丝IS02均形成了锁状联合。 【结论] I、所试验的6种食用菌对AEC抗性的显著不同，反映出其代谢途径中相关酶受 终产物反馈抑制的敏感程度显著不同，值得对其相关酶(如AK，等)作进一步研究。2、 AEC抗性菌株的相关游离氨基酸和总氨基酸含量的相应提高，表明利用突变和筛选程序可 以选育出高天冬氮酸族含量的食用菌新品种。3、本研究为食用菌氮基酸代谢途径和氪基 酸品种改良奠定了理论与实验基础。 关键词：s一(2一氨基乙基)一2’半胱氨酸；金针菇：粉孢子：AEC抗性：天冬氨酸族氮基酸 Abstract 【Purpose】 is work aminoacids of agricultural qualitymajor plants Improving breeding．ThreonJne， whichale