基质金属蛋白酶9在胎膜早破表达和作用.pdfVIP

中文摘要 前 言 胎膜早破(PROM)是威胁母儿健康的产科常见并发症，近年来胎膜早 破的发生有增加倾向，是当前产科临床处理较棘手的问题之一。胎膜早破 月前胎膜早破的30％一40％孕妇发生早产。胎膜早破发生后，感染、早产、 脐带脱垂、胎盘早剥、羊水栓塞、羊水减少、胎儿窘迫等并发症的发生率明显 增加，大大增加了围生期母儿的发病率和死亡率。 胎膜早破是由于加速细胞外基质(ECM)降解，膜张力减弱引起的。有 四类水解酶参与细胞外基质降解，分别是丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、 天冬氨酸蛋白酶和基质金属蛋白酶，而基质金属蛋白酶是其中最重要和最 复杂的一类酶。基质金属蛋白酶9(MMP一9)是基质金属蛋白酶家族的一 员，是分子量最大的依赖锌的酶，激活后能降解IV型胶原、变形的胶原纤维 和层粘连蛋白、弹性蛋白等细胞外基质。IV型胶原是羊膜绒毛膜基底膜的 主要成分，维持胎膜的张力。MMP-9降解IV型胶原，胎膜张力减低，最终 导致胎膜早破。最近的研究表明，羊膜上皮细胞和绒毛膜滋养细胞产生 MMP一9，羊膜上皮细胞层和绒毛膜滋养细胞层MMP-9的诱生降解了基底膜 的细胞外基质，导致细胞分离和凋亡。 本实验通过研究MMP-9在发生胎膜早破和非胎膜早破时羊膜绒毛膜 的表达差异，可能为进一步阐明其在胎膜早破的发生机制提供依据，为临床 上应用其拮抗剂阻断胎膜早破的发生提供可能，从而降低因胎膜早破而增 加的产科并发症。 材料和方法 胎膜早破(PROM)组羊膜绒毛膜组织取自中国医大二院产科病房30 例不明原因发生胎膜早破的产妇，非胎膜早破组羊膜绒毛膜组织取自16例 不明原因发生早产的产妇，10例足月产的产妇。标本取自2003年2月一 ·1· 2003年lo月。病例选择无产科并发症和合并征，头位单胎，自然分娩的初 产妇。分娩后剪取胎膜破裂口周围1×1．5cm2的胎膜，之后在平衡盐水溶 液中清洗三次，然后除去附着的血污，除去蜕膜，置于10％甲醛溶液中，石 蜡包埋，切片备用。 实验方法 采用免疫组化链霉菌生物素蛋白一过氧化酶连接法(SP法)检测30例 胎膜早破组和16例胎膜完整的早产组和10例足月产组羊膜绒毛膜上基质 金属蛋白酶9的表达特点和综合光密度A值。石蜡切片脱蜡，0．3％H，O， 封闭内源性过氧化物酶，滴加一抗山羊抗人MMP-9多克隆抗体，滴加二抗 兔抗山羊IgG后，漓加酶标底物(辣根酶标记链霉亲和素)，DAB显色，苏木 案复染。同时设空白对照，采用PBS代替一抗，其余步骤同上。细胞浆内 有棕黄色颗粒沉着为阳性表达再用病理图象分析系统，测定显色区的综合 光密度值，应用t检验进行资料分析。 结 果 MMP一9在胎膜早破、早产(PET)、足月产羊膜绒毛膜上均有表达，定位 于细胞浆内，呈棕黄色颗粒沉着，MMP-9在发生胎膜早破时羊膜绒毛膜上 高表达，在无胎膜早破的早产和足月产羊膜绒毛膜上低表达。应用病理图 像分析系统测定MMP-9光密度A值，测定结果如下：妊娠3l周一33周”， PROM组和足月产组差异有显著性(P=0．005)。 结 论 1．MMP-9在发生胎膜早破时羊膜绒毛膜上高表达，在无胎膜早破的早 ·2· 产和足月产羊膜绒毛膜上低表达。 2．发生胎膜早破时MMP-9的综合光密度A值显著高于非胎膜早破的 胎膜早破的发生。 关键词：基质金属蛋白酶9；羊膜绒毛膜；胎膜早破；早产 ·3· matrix 9in of Roles metalloproteinase membranes the