中度嗜盐菌Halomonas+sp.TA-4产四氢嘧啶发酵条件优化与四氢嘧啶生物学功能初探.pdfVIP

摘要 面对自然或人工环境中随时存在的失去胞内外渗透压平衡的威胁，大部分微生物 在长期的进化过程中形成了其独特的应对机制，其中最重要的就是大多数嗜盐微生物 通过在胞内积累相容性溶质来调节渗透压的变化并维持细胞正常的代谢活动。由于这 是一种非常灵活的短期或瞬变的反应，随外界渗透压的变化而变化，它成为人们研究 调渗机制较好的模型，也是目前微生物渗透压研究的热点，而相容性溶质作为这种机 制中重要的功能物质也在近些年来受到人们广泛的关注。四氢嘧啶类物质是目前发现 的在细菌界分布最广泛的相容性溶质，它不仅是一种重要的渗透压调节剂而且也对遭 受干燥、冷冻、辐射等不良环境胁迫的细胞和生物大分子有着很好的保护作用，具有 重要的研究意义和广阔的应用前景。因此，本文对采集自同安盐田土样进行了四氢嘧 啶产生菌的筛选和发酵特性的研究，同时也对四氢嘧啶的某些生物学功能进行了探索， 为我国在此领域的研究和开发提供参考资料。 对筛选到的以四氢嘧啶为主要相容性溶质的TA．4菌株进行分类鉴定及其发酵条件 的优化。TA．4经生理生化试验和16S 似度最高，是一株中度嗜盐菌，其耐盐范围广，可以在渗透压变化时快速的合成或释 放出胞内的相容性溶质，经的起高渗和低渗环境的交替冲击而死亡率较低，是能够用 于细菌挤奶工艺生产四氢嘧啶的优势菌株。为了在实际生产中提高四氢嘧啶的产量， 我们对菌株TA．4产四氢嘧啶的发酵条件进行了研究并确定其最佳培养基的主要成分为 120；最适培养条件是：将已在5％NaCl培 (g／L)：酵母膏4．0，谷氨酸钠60，NaCl 中继续培养24d,时。在已优化条件下，菌株TA一4发酵液中的四氢嘧啶产量可以达到 633．1mg／L。 作为细菌界重要的相容性溶质，四氢嘧啶有很多极具开发潜力和应用价值的生物 学功能。在本文中我们对其在高温和活性氧自由基胁迫条件下保护细胞及生物大分的 作用进行了探索与研究。结果表明四氢嘧啶对遭受热胁迫的嗜盐菌和非嗜盐菌细胞都 有着很好的保护作用，它能够提高细胞的热耐受性，解除高温对菌体生长的抑制作用， 并且随着浓度的升高，这种保护作用愈加明显。四氢嘧啶还是一种高效的抗氧化剂。 与水杨酸的羟自由基竞争性捕获试验、DNA缺口试验以及丙酮酸激酶失活试验有力的 证明了它不仅可以比甘露醇更为有效地清除羟基自由基，而且能够作为超螺旋 I Ks和丙酮酸激酶的保护剂，大大降低羟自由基对其结构和活性的破坏。 pBluescriptII 关键词：四氢嘧啶；发酵条件；生物学功能 Abstract Most evolvedtheirown to withthe have microorganisms strategiescope ever-present threatof osmotic ineithernaturalorartificialenvironmentand losing equilibrium among these intracellular solutestowithstandtheextracellular strategies，accumulatingcompatible in normalcellmetabolisms fluctuations andmaintain osmolarity employedbyhalophilic bacteriumisknownasthemost one．Asa termorinstantaneous important sensitive，short reactionwhichis controlledtheenvironmentalos