低氧培养下小胶质细胞功能状态及研究.pdfVIP

低氧培养下小胶质细胞功能状态研究 硕士生姓名： 王泽蕴 指导教师： 李丹清教授 专业名称： 内科学 摘 要 目的：小胶质细胞在脑缺血缺氧等中枢神经系统病变中发挥着既保 护又损伤的“双刃剑”作用。不同损伤刺激条件下，其功能状态不同，造 成这种变化的机制目前不清。故本研究目的旨在探讨不同低氧刺激条件 下小胶质细胞功能状态变化及引起这种变化的可能机制。 2细 方法：以小鼠小胶质细胞瘤BV2细胞株和大鼠嗜铬细胞瘤PCI 胞株为研究对象，分别用其来代表小胶质细胞和神经元。低氧条件下培 12细 养BV2细胞，用其培养液培养PCI2细胞，通过CCK．8法测定PC 胞在不同功能状态下分泌表达TNF．a、IL．1 2 B、NGF情况。本研究中，PCI 细胞被分为5组，即：低氧Ih组、低氧4h组、低氧l2h组、损伤对照 1 组及正常对照组。正常对照组为仅用新鲜DMEM培养基培养的PC2细 2细胞组： 胞组；损伤对照组为用过氧化氢和DMEM培养基培养的PCI h、4h、1 低氧1 2h组分别是指用过氧化氢和低氧培养lh、4h、l2h的BV2 细胞培养液培养的PCI2细胞组。 结果：1．BV2细胞在低氧培养下形态发生变化，随着低氧时间延长， 细胞逐渐变圆，突起逐渐消失。 l h、4h、 2．正常对照组PC2细胞存活率如按100％来计算，则在低氧1 1 l 1．16％ 2h组及损伤对照组PC2细胞存活率分别为75．88％、51．09％、l h组PCl 和55．58％。与损伤对照组相比，低氧1 2细胞存活率明显提高 2h组PCI 12 (pO．01)，低氧l 2细胞存活率明显下降(p0．01)，低氧4h组PC 细胞存活率虽有下降但无统计学意义(p0．05)。 h，其分泌的TNF．0【、IL．1 3．BV2细胞低氧培养1 D、NGF分别为 3士1 289．1 2h， 5．25pg／ml、37．824-1．17pg／ml；随着低氧培养时间继续延长到l TNF．仅和 IL．1 水平进一步增加到474．88+l 和 p 9．07pg／ml 3 ． 8．08士1．60pg／ml。 86．63士21．62pg／ml，而NGF的水平则下降到1 结论：1．小胶质细胞在低氧刺激下形态、功能发生变