旋毛虫p43和p53核酸疫苗的构建及其免疫效果的研究.pdf

鼍置晕曼量量_曼暑舅皇曼量菖量置皇皇曼葛皇曼曼曼曼曼曼墨置皇甚皇量舅舅 ZZ葛anMZ —二———』二哟!I则必 目 录 摘要……………………………………………………………………………………………………………………………………．．1 英文摘要……………………………………………………………………………………………．IIl 1前言…………………………………………………………………………………………………．1 1．1旋毛虫及旋毛虫病………………………………………………………………………………1 1．2旋毛虫的排泄分泌抗原、p43与p53的研究进展…………………………………………1 1．2．1排泄分泌抗原的研究进展………………………………………………………………l 1．2．2旋毛虫p43基冈的研究进展……………………………………………………………2 1．2．3旋毛虫p53基冈的研究进展……………………………………………………………3 1．3核酸疫苗及在旋毛虫中的应用………………………………………………………………3 1．3．1核酸疫苗的研究意义……………………………………………………………………．3 1．3．2核酸疫苗的优缺点………………………………………………………………………4 1．3．3旋毛虫核酸疫苗的研究意义及进展……………………………………………………。4 1．4旋毛虫心肌损伤的研究………………………………………………………………………5 1．5Tbll样受体………………………………………………………………………………………6 1．6研究目的与意义………………………………………………………………………………6 2材料和方法…………………………………………………………………………………………．7 2．I材料……………………………………………………………………………………………………………………………7 2．1．1．虫种……………………………………………………………………………………………………………………．7 2．1．2试验动物…………………………………………………………………………………一7 2．1．3主要试剂…………………………………………………………………………………7 2．1．4主要试验仪器及设备……………………………………………………………………8 2．1．5主要生物信息学软件……………………………………………………………………8 2．2方法……………………………………………………………………………………………．9 2．2．1目的基闪的克隆…………………………………………………………………………………．9 2．2．2重组表达质粒的构建……………………………………………………………………12 2．2．3核酸疫苗免疫保护性试验………………………………………………………………13 2．2．4应．【lj 况……………．………………………．．………………………………………………………………………………………．15 3结果………………………………………………………………………………………………．17 3．1目的基冈的克隆……………………………………………………………………………．17 3．1．1旋毛虫总RNA提取结果………………………………………………………………17 3．1．2 3．1．4 3．2核酸疫苗对小鼠的免疫效果………………………………………………………………。24 j：北农ql：丈学农学硕。学位论文 篁皇舅曼曼曼曼曼曼曼皇曼曼曼皇皇曼曼置量舅曼曼皇曼曼曼曼曼曼!鼍曼鼍詈量皇皇曼曼曼曼鼍詈璺!曼曼曼曼曼曼鼍!鼍曼曼曼曼曼曼曼曼曼鼍曼曼曼曼曼曼鼍曼曼 3．2．1核酸疫苗对感染旋毛虫小鼠的免疫保护效果………………………………………．．24 3．2．2抗体水平的检测…………………………………………………………………………．．25 3．2．3H．FABPE1．。ISA检测结果………………………………………………………………．．25 3．2．4流式细胞术检测T细胞Ⅱ类…………………………………………………………．．26 3．3荧光定量方法检测TLR2与TLR4的变