《PCR-DGGE结合种特异性PCR技术检测市售酸奶中乳酸菌 Detection of Lactic Acid Bacteria in Commercial Yoghurt by PCR-DGGE Combined with Species-Specific PCR》.pdfVIP

253 ※分析检测 艮晶科学 2015,、，01．34．No．08 市售酸奶中乳酸菌 王营，孟祥晨丰 (东北农业大学食品学院，乳品科学教育部重点实验室，黑龙江哈尔滨 150030) 摘要：应用多聚酶链式反应结合变性梯度凝胶电泳技术(PCR．DGGE)，并结合种特异性PCR技术检测酸奶中的 乳酸菌组成。优化DGGE检测相关条件，结果表明最佳DGGE条件为：凝胶变性梯度范围30％～60％，电泳时间 300min。利用上述条件能有效区分植物乳杆菌、乳双歧杆菌，但是无法区分保加利亚乳杆菌与嗜酸乳杆菌，嗜热链 球菌、鼠李糖乳杆菌与干酪乳杆菌；在此结果基础上，再采用种特异性PCR技术，能够有效区分上述存在共迁移现 象的菌株。采用上述技术检测6种市售酸奶中乳酸菌，发现6种产品中均包含保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、植物乳 杆菌和嗜酸乳杆菌：3种产品含有干酪乳杆菌：1种产品标识有双歧杆菌，但未检测到。通过选择性培养基分离计数 酸奶样品中乳酸菌，两种方法所得的检测结果相同，验证检测上述方法的可靠性。研究表明，PCR—DGGE与种特异 性PCR技术结合可有效检测酸奶中乳酸菌组成。 关键词：变性梯度凝胶电泳；种特异性PCR扩增：乳酸菌；酸奶 DetectionofLacticAcidBacteriainCommercialPCR—DGGECombinedwith PCR Yoghurtby Species—Specific WANG Ying，MENGXiang—chen半 Scienceand of of ofFood (KeyLaboratoryDairyScience，MinistryEducation，College Technology， Northeast 150030，China) AgriculturalUniversity，Harbin chainreaction with Abstract：Polymerasedenaturinggradientgelelectrophoresis(PCR-DGGE)combinedspecies-specific PCRwas todetectlacticacidbacteriaincommercial were used conditions andtheresults yoghurts．DGGE optimized the conditionsofDGGEwere and indicatedthat 30％-60％denaturant 300min optimal range gradient electrophoresis． Lactobaci