《J亚群禽白血病SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立 Development of SYBR Green Ⅰ real-time RT-PCR assay for the detection of subgroup J avian leukosis virus》.pdfVIP

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《J亚群禽白血病SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立 Development of SYBR Green Ⅰ real-time RT-PCR assay for the detection of subgroup J avian leukosis virus》.pdf

第35卷第9期 中国预防兽医学报 V01.35.No.9 2013年9月 ChineseJournalofPreventive Medicine Veterinary Sep.2013 doi:10.39698.issn.1008—0589.2013.09.11 Green J亚群禽白血病SYBR l荧光定量PCR 检测方法的建立 王 莉1,黄安宁1,李槿年P,张丹俊2,刘雪兰, (1.安徽农业大学动物科技学院,安徽合肥230036;2.安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,安徽合肥230031) Green 摘 I荧光定量 要:为建立一种能够快速、灵敏和特异地检测J亚群禽白血病病毒(ALV—J)的SYBR 258 bp~ 5802 bp)为检测目的片段,构建重组质粒并作为靶基因,通过对其浓度、引物浓度和退火温度的优化,建立了 ALV—JSYBRGreen 100倍;与其他禽源病毒无交叉反应;批内和批间变异系数均小于5%。表明本研究建立的方法具有良好的特异 鸡,检测病毒基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的分布与表达水平,结果表明ALV.J在各主要脏器中均 有分布,但以肾脏中的病毒表达量最高。 Green 关键词:J亚群禽白血病病毒;SYBR I;荧光定量PCR;病毒基因表达水平 中图分类号:$852.65 文献标识码:A RT·PCR ofSYBRGreenIreal—time Development assay forthedetectionof Javianleukosisvirus subgroup WANG Xue—lanl Lil,HUANG Jin-nianr,ZHANGDan-jun2,LIU An—nin91,LI ofAnimalScienceand 230036,China; (1.College Technology,AnhuiAgriculturalUniversity,Hefei of 23003 2.Animal and Institute,Anhui Science,Hefei1,China) HusbandryVeterinary AcademyAgricultural real—timeRT-PCRfor avianleukosisvir

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