《不同氨基酸模式对奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白合成的影响 Effects of Different Amino Acid Patterns on Casein Synthesis in Mammary Epithelial Cells of Dairy Cows》.pdfVIP

动物营养学报2013，25(8)：1762一1768 函伽船P如“MZ o，A，l胁f№删ffD，l doj：10．3969／j．issn．1006-267x．2013．08．013 不同氨基酸模式对奶牛乳腺上皮细胞 酪蛋白合成的影响 张兴夫1杜瑞平2敖长金H高民2+卢德勋2 摘 要：本试验旨在验证氨基酸模式的不同是否会影响奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白的合成。采 用完全随机试验设计设置4个组，分别为低蛋白质饲粮条件下血液氨基酸模式组(LPBP)、全乳 附法(ELISA)检测乳蛋白合成基因o【。。一酪蛋白(C．SMS1)和K一酪蛋白(酣№)mRNA表达量 及仪。一酪蛋白合成量。结果表明：氨基酸模式能够显著影响邯帆sl和邵旧基因mRNA表达 LPBP组(P0．01)。由此可见，氨基酸模式的不同能够影响奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白的合成， 全乳蛋白氨基酸模式可能是一种较为理想的氨基酸模式。 关键词：乳腺上皮细胞；氨基酸模式；基因表达；酪蛋白 中图分类号：S823 文献标识码：A 乳蛋白是构成牛奶品质的重要基础，氨基酸 目前以奶牛乳腺上皮细胞为试验对象，在转录水 作为重要的前体物质对乳蛋白的合成具有调控作 平和蛋白质合成水平上针对不同氨基酸模式对乳 用¨’3J。近年来，理想氨基酸平衡模式已在猪禽饲 蛋白合成影响的研究还未见报道。本试验在建立 粮配方中得到广泛的应用H。5J，但是由于反刍动物 奶牛乳腺上皮细胞培养法的基础上，分别用实时 自身的消化特点，针对于反刍动物理想氨基酸模 式的研究还有待深入。有研究证实，饲粮中氨基 酸组成能够影响泌乳反刍动物乳腺合成乳蛋白的 能力∞1，因此可以推测，或许存在着一种能够使奶 d。一酪蛋白合成量，验证氨基酸模式的不同是否 牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成能力达到最优的氨基 会影响乳腺上皮细胞酪蛋白的合成，并初步提出 酸模式。在国际上，研究者大多通过添加过瘤胃 能够促进酪蛋白合成的较为理想的氨基酸模式。 保护氨基酸，或者真胃灌注不同组成模式的氨基 酸，研究其对乳蛋白合成的影响。卜101；在国内，研 1材料与方法 究者以奶山羊为试验模型，采用阴外动脉灌注技 1．1试验设计 术研究氨基酸平衡对乳蛋白含量的影响¨1|。但是 试验采用完全随机试验设计设置4个组，分 收稿日期：2012—02—18 基金项目：国家“973”计划项目(2011cBl00803) }通讯作者：敖长金，教授，博士生导师，E-mail：chaIl鲥inao@yalloo．com．c“；高 COm．Cn 万方数据 8期 张兴夫等：不同氨基酸模式对奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白合成的影响 别为低蛋白质饲粮条件下血液氨基酸模式组 氨基酸配比见表1。试验开始前，分别配制4种氨 (LPBP)‘1引、全乳蛋白氨基酸模式组(MP)‘13J、 基酸模式的培养基，配制方法参考DMEM／F12培 80％酪蛋白+20％乳清蛋白氨基酸模式组养基配方，各培养基中总氨基酸浓度均为 l070 (CLP)‘141、酪蛋白氨基酸模式组(cP)‘141，每个组mg／L，配制完成后调整培养基pH在7．0— 3个重复，并重复试验3次。4种氨基酸模式组的 7．4之间。 表1不同氨基酸模式组的氨基酸配比 Tablel of锄inoacidsin ofd旅rent锄inoacid ％ Percentage gmups pa仕ems ofdifferentaminoacid 氨基酸 不同氨基酸模式组Gmups pattems Aminoacids LPBP MP CLP CP 1．2乳腺上皮细