《东北梅花鹿Galectin-1基因RNAi载体的构建 Construction of vector for northeast China deer Galectin-1 gene RNAi》.pdfVIP

第44卷第9期 东北农业大学学报 44(9)：57—62 2013年9月 JoumalofNortheast 2013 A出culturalUniversity September 15：13：34 网络出版时间2013-9—23 [URL]http：／／www．cnki．net／kcms／detail／23．1391．S1513．012．html 东北梅花鹿Galectin一1基因RNAi载体的构建 秦欣欣L2，孙红梅2，褚文辉2，王大涛2，郭倩倩L2，章秀婷2，李春义p (1．江苏科技大学生物与化学工程学院，江苏镇江212018；2．中国农业科学院特产研究所， 吉林省特种经济动物分子生物学国家重点实验室培育基地，长春130112) mRNA特异性shRNAs，两端分别带有ClaI／MluI酶切位点和一个9nt发夹结 区骨膜细胞系。设计2对galectin一1 构，通过基因克隆技术将其插入真核表达质粒pLVTHM中，构建galectin一1shRNA表达载体，利用PCR和测序筛 选出阳性质粒。将重组质粒与PPAX及pMD2．G共转染到293t细胞中，在倒置显微镜下观察转染效果并收集、浓缩 病毒质粒，感染生茸区骨膜细胞。结果表明，成功构建东北梅花鹿galectin一1基因RNAi载体，获得稳定传代被感 染生茸区骨膜细胞系，为进一步研究肛fec￡讥一1基因在鹿茸再生中的作用奠定基础。 关键词：鹿茸再生；galectin一1基因；RNAi；生茸骨膜细胞 中图分类号：$767．5；X172文献标志码：A 文章编号：1005—9369(2013)09—0057—06 秦欣欣，孙红梅，褚文辉，等．东北梅花鹿Galectin-1基因RNAi载体的构建【J】．东北农业大学学报，201 3，44(9)：57．62． QinXinxin。Sun a1．ConstructionofvectorfornorlheastChinadeerGalec“n-1 Hongmei，ChuWenhui，et geneRNAi[J]．Jour- nalofNoflheast Chinesewith AgriculturalUniversity,2013，44(9)：57—62．(in Englishabstract) ConstructionofvectorfornortheastChinadeerGalectin一1RNAi／ gene QIN Xinxinl’，SUN Wenhui2，WANG Hongmei2，CHU Data02，Guo Qianqian他，ZHANGXiutin92，LI andchemical ofScience Chunyi2(1．Biologicalengineeringinstitute，JiangsuUniversity and Technology, 212