《6-羟多巴胺对嗜铬细胞瘤细胞单胺类神经递质及其合成限速酶基因的作用》.pdfVIP

生堡盟经壁盘查!!!!生!旦筮笪鲞笠!塑垦!也』盟!!盟!：垒!艘墅!Q!!：!!!：箜：盟!：1 ·605· ．基础研究． 6．羟多巴胺对嗜铬细胞瘤细胞单胺类 神经递质及其合成限速酶基因的 作用 邢红霞 刘胜 朱元凯 田小军 史莉瑾 王玉梅 张博爱 【摘要】 目的探讨6一羟多巴胺(6-OHDA)对大鼠嗜铬细胞瘤(PCI2)细胞单胺类5．羟色胺(5一 HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺递质及其合成限速酶基因色氨酸羟化酶(TpH)mRNA、多巴胺p羟 化酶(DBH)mRNA和酪氨酸羟化酶(TH)mRNA的影响，及囊泡单胺类转运体(VMAT)功能抑制对上 述物质的作用。方法分别用不同浓度6-OHDA(25、50、100、200 I-Lmol／L)，不同浓度的VMAT功能 抑制剂利血平(50、100、400、1600 nmol／L)与6-OHDA(100 ixmol／L)作用于PCI2细胞，于不同时间点 (0、12、24、36、48 h)用四甲基偶氮唑盐(MTr)法检测细胞活性，酶联免疫(ELISA)法检测细胞内5一 对表达量。结果 (1)加入不同浓度的6-OHDA时，PCI2细胞中细胞活性随6-OHDA浓度增加而下 降，并随作用时间的延长浓度降低更加明显。而在100 6-OHDA组中，随着利血平浓度的增 Ixmol／L 加，细胞活性显著下降，差异有统计学意义。PCI2细胞中5-HT浓度随6-OHDA浓度增加下降不明 显，但在同一浓度组中随作用时间的延长浓度降低明显，尤其在36h时间点浓度最低。NE随6一 OHDA浓度增加显著下降，并随作用时间的延长表达量降低更加明显。多巴胺浓度随6．OHDA浓度 增加显著降低，但随作用时间的延长浓度变化不明显。100 6-OHDA组中，随着利血平浓度的 p。mol／L 增加，5-HT、NE及多巴胺浓度显著下降，差异有统计学意义。(2)与对照组相比，加入不同浓度的6一 6-OHDA组中，随着利血平浓度的增加(50、 用时间的延长表达量降低更加明显，而在100仙moL／L 100、400、1600 0．003±0．001，0．002±0．001，0．001±0．000)表达显著下降，差异有统计学意义(F值分别为 13。336、9．000、9，393，均P=0．ooo)。结论6一OHDA能诱导PCI2细胞活性降低，诱导5一HT、NE、多 巴胺递质浓度及TpHmRNA、DpHmRNA、THmRNA表达的降低，并呈剂量及时间依赖性，VMAT功能 抑制加重上述变化。 【关键词】羟多巴胺；PCI2细胞；利血平；囊泡单胺转运蛋白质类；多巴胺p羟化酶 and for monoamine onmonoamine Effectsof inhibitorsvesicular 6．hydroxydopamine transporter PCI2cellsX|NG neurotransmitterand ofthemln Hong—xia。．HU e