《p53基因在5-aza诱导小鼠胚胎干细胞向心肌样细胞分化中表达的研究》.pdfVIP

第45卷第4期 哈尔滨医科大擎学报 v01．45．No．4 ‘ 304 2011年8月 JouRNALOFHARBINMEDIcALuNⅣERsITY Aug．，20ll p53基因在5一aza诱导小鼠胚胎干细胞 向心肌样细胞分化中表达的研究 刘端阳，董钦，李凤兰，马宁，李+晖。 (哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室，黑龙江哈尔滨150081) [摘要] 日曲检测p53基因及其蛋白在5一撇诱导c，H，。T，儿向心肌样细胞分化过程中的变化，进而 探讨p53基因及其蛋白在胚胎早期心肌分化过程中发挥作用的条件。方法以lO叫L的5．北a诱 导c3H—oT·儿向心肌样细胞分化，分别选取诱导后1周、2周、3周、4周这4个时间点进行样品收集。1r- izol法提取诱导后细胞的总RNA，应用RT—PCR方法检测p53基因、肌钙蛋白I的表达情况；应用免疫细 胞化学方法检测P53蛋白和心肌肌球蛋白重链的表达情况。结摹在mRNA水平，p53在诱导后l周 和诱导后3周表达量较诱导后2周、4周要高；在蛋白水平，随着诱导时间的延长，蛋白表达量没有降低。 而是维持在一定的水平甚至有所增加。结论在5一a龃诱导c，H。。T。庀向心肌样细胞分化过程中，P：53蛋 白维持一定水平的表达是5一配a发挥其作用的先决条件。 [关键词]p53；5-铊a；细胞分化；干细胞；心肌诱导分化 [中图分类号]R321[文献标识码]A [文章编号]1000一1905(2011)04—0304一04 Expressi蚰ofp53 EScelIs gene“ringinducing“ce into ceUs稍th5-aza myocardial UU Hui Duan—yaflg，DONGQin，LI Feng—laIl，MANing，U (上)ep口n砌眦妒B幻ckm括町口以胁kukB幻三0影，肌r6in 15008l，仇i耽) Todetectandits Abst鞠ct：ObjecUve vaIiation IIliceESceUs p53 protein’s duringinducing into ceⅡswitll5-azaand to then their condition myocardial pre8umepossibleworking the during heart 0f eady w鹊induced试t}I deVelopmentyoungembryo．MetlIodsC3H10T1／2 10“moL／L were couected 1 aIld 5啦a．S锄ples respectively础erinducingw，2w，3w4w．Tot砒RNAw鹕 con的cted method肌dtllendetectedtlleir 0f aIId I．，11le using％zol expression p53 tmponin off)：53wasaLlsodetected e)【pression and出sothe o