《P物质与表皮干细胞联用对糖尿病大鼠创面愈合与神经再生的影响》.pdfVIP

生垡丝堕垂查!!!!芏!旦蔓垫鲞蔓!塑业虫!!!!!!堡!巴!型垫!!!!!!：垫：塑!：! ．仓U面修复探索· P物质与表皮干细胞联用对糖尿病大鼠 创面愈合与神经再生的影响 朱飞滨 刘德伍张红艳徐俊赐 彭燕钟清玲李勇铁 r■■▲y二 【摘要】 目的观察感觉神经肽P物质与表皮干细胞(ESC)联合应用对糖尿病大鼠创面愈合 与神经再生的作用。 方法分离培养sD大鼠ESC(经鉴定)，接种于羊膜滋养层上构建羊膜·ESC 】一 备用。选择48只糖尿病模型大鼠，每只背部制作4个全层皮肤缺损刨面。按随机抽签法将此192个 创面分为ESC+P物质组、ESC组、P物质组、对照组，每组48个创面。ESC4-P物质组和ESC组创面 均移植羊膜一ESC．P物质组、对照组创面移植羊膜。移植后．ESC+P物质组、P物质组在创周及创面 250 中央注射1×10。mol／L的P物质250“L．ESC组、对照组在创周及创面中央注射PBSpL作对 照，各组每日注射2次，连用4d。于大鼠伤后4、7、10、14．、17、23d，观察并计算创面愈合率(每时相点 8个创面)，HE染色观察创面组织结构改变。伤后4、7、10d，行Masson染色观察创面组织总胶原分 d，用免疫组织化学染色法观察创面组织 布，免疫组织化学染色观察I、Ⅲ型胶原沉积量。伤后14、23 中蛋白基因产物9，5(PGP9．5)及P物质阳性神经纤维分布情况。对数据行单因素方差分析和t检 验。 结果(1)ESC+P物质组伤后14d创面愈合率达1000％，明显早于ESC组、P物质组、对照 d)。HE染色显示ESC+P物质组创面愈合质量明显优于其余3组。 组完全愈合时间(伤后17、17、23 (2)伤后10d，ESC+P物质组与P物质组创面组织中胶原着色深、面积广；其余2组胶原染色较浅、 面积较小。随着伤后时间推移．各组创面I型胶原沉积量逐渐升高，Ⅲ型胶原沉积量逐渐下降。伤后 4、7、10d，ESC+P物质组I型胶原沉积量明显高于ESC组(t值分别为32．72、118．21、26．71。P值均 小于0．01)和对照组(t值分别为“．37、2276、30．32，P值均小于0．01)；ESC+P物质组与P物质组 水平相对接近。伤后4、7、10d，ESC+P物质组创面Ⅲ型胶原沉积量明显高于ESC组(t值分别为 32．27、28 24，P值均小于 68、1451，P值均小于0．01)和对照组(t值分别为35．68、22．52、22 0 9 01)。(3)ESC+P物质组与P物质组创面组织中有大量PGP5和P物质阳性神经纤维再生，创 面深层部分神经纤维末梢向表皮延伸。ESC组、对照组仅见创面深层有少量PGP9．5和P物质阳性 d，ESG+P物质组创面PGP9．5阳性神经纤维面积占 神经纤维，且未向表皮延伸。伤后14、23 (3．86±0．25)％、(7、03±0．28)％．明显高于ESC组[(1．48±0，30)％、(3．01±043)％，t值分别为 2395、3027，P值均小于001]和对照组[(I．46±0．23)％、(2．84±0．29)％。l值分别为27．35、 40．32．P值均小于0．01]。伤后14、23d。ESC+P物质组创面P物质阳性神经纤维面积占(2．01± 0．14)％、(1．19±0．1I)％．明显高于ESC组[(0．85±017)％、(1．34±0．21)％．f值分另0为20．50、 2．60，P0．05或PO．01]和对照组[(O．74±0．15)％、(1．30±017)％，t值分别为23．98、2．41，P‘ 结论感觉神经肽P物质和ESC联合应用。可以有效促进糖尿病大鼠创面愈 0．05或PO．01]。 合与神经再生。 【关键词】P物质；糖尿病；神经再生；表皮干细胞；创面愈合 Effect