微量肉汤稀释法和琼脂稀释法检测Hp耐药性的比较.pdfVIP

Y1900778 目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………··5 研究论文微量肉汤稀释法与琼脂稀释法检测Hp耐药性的比较 前言………………………………………………………………………………………·lO 刖舌………………………………………………………………………………………‘lU 材料与方法……………………………………………………………10 结果………………………………………………………………………………………·16 8 附图………………………………………………………………………1 附表………………………………………………………………………………………·25 讨{仑………………………………………………………………………………………·28 结论………………………………………………………………………………………·33 参考文献…………………………………………………………………33 综述 幽门螺杆菌药敏试验方法的现状…………………………………39 致{射………………………………………………………………………………………………48 个人简历……………………………………………………………………49 中文摘要 微量肉汤稀释法与琼脂稀释法检测Hp耐药性的比较 摘 要 目的：幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)是浅表性胃炎、消化性 溃疡的致病因子，与胃癌、胃黏膜相关样淋巴组织瘤(MALT)密切相关， 世界上约有一半以上的人感染Hp。目前使用抗生素根除Hp是治疗胃炎、 消化道溃疡研究最透彻的方法。在使用根治Hp抗生素中，质子泵抑制药、 克拉霉素、硝基咪唑类药物三联疗法最为流行。硝基咪唑类抗生素中，甲 硝唑、替硝唑和奥硝唑分属于该类抗生素的第一、第二和第三代，近几年 的研究显示，Hp对甲硝唑的耐药率越来越高。利福霉素类药物如利福平 常用于抗结核病治疗，较少用于Hp感染的治疗，但近几年的研究显示， 幽门螺杆菌对利福平的耐药率很低，可作为治疗幽门螺杆菌的新药。本研 究是通过用琼脂稀释法和肉汤稀释法检测Hp对三种硝基咪唑类药物及利 福平的耐药率并进行比较，旨在为实验室操作提供方法学比较的数据，并 对Hp的治疗提供选药依据，指导临床医生合理使用抗生素。 方法： 究中心经API系统鉴定、保存的Hp临床分离株53株，质控菌株 及l株质控菌(最后一次实验只检测4株临床菌和1株质控菌)。 2琼脂稀释法检测Hp对甲硝唑、替硝唑、奥硝唑和利福平的耐药性： 首先，配制药物原液。分别将甲硝唑、替硝唑、奥硝唑O．02569溶于O．1瑚 的甲醛溶液，后用无菌蒸馏水稀释至浓度为5¨g·ml～。第二，在平皿内倍 比稀释药物。将各药物原液与Hp琼脂培养基按l：19比例混合，则此时 Hp琼脂培养基分别将各原液依次倍比稀释，共有十二个梯度，硝基咪唑药 物的浓度梯度分别为256pg·ml一、128pg·ml一、64肛g．ml～、32“g．ml～、 1 中文摘要 1 O．0625“g·ml～，O．032“g·ml～，O．O 同时倾倒不含药的琼脂培养基做无药生长对照。第三，标注平板。在每个 平板上画出8个扇区(7个扇区为临床分离株所用，另外1个为质控菌株 所用)，标记药物、浓度及每个扇区的菌株号。第四，菌液制备：在菌株 复苏传代至第三代后，选生长良好菌落增菌，制成菌悬液，使菌液浊度达 到麦氏2．O。第五，接种培养。用微量移液器吸取2“l各菌悬液点样接种 于各药物各浓度平板上相应的位置。37℃微需氧培养3天后观察结果，能 抑制细菌生长的最小药物浓度为药物对细菌的最低抑菌浓度(MIC)，记 录四种药物对每株菌的最低抑菌浓度。