分子生物学第四章 生物信息的传递(下).ppt

本章主要内容 序. 基因与基因表达的一般概念 一. 遗传密码——三联子 二． tRNA 三．AA- tRNA合成酶 四．核糖体 五. 蛋白质的生物合成 六。蛋白质运转机制 序. 基因与基因表达的一般概念 基因作为唯一能够自主复制、永久存在的单位，其生理学功能以蛋白质形式得到表达。 DNA序列是遗传信息的贮存者，它通过自主复制得到永存，并通过转录生成mRNA，翻译生成蛋白质的过程控制所有生命现象。 序. 基因与基因表达的一般概念 基因表达包括转录（transcription）和翻译（translation）两个阶段。 转录是指拷贝出一条与DNA链序列完全相同（除了T→U之外）的RNA单链的过程，是基因表达的核心步骤。 序. 基因与基因表达的一般概念 翻译是指以新生的mRNA为模板，把核苷酸三联子遗传密码翻译成氨基酸序列、合成蛋白质多肽链的过程，是基因表达的最终目的。 只有mRNA所携带的遗传信息才被用来指导蛋白质生物合成，所以人们一般用U、C、A、G这4种核苷酸而不是T、C、A、G的组合来表示遗传性状。 所谓翻译是指将mRNA链上的核苷酸从一个特定的起始位点开始，按每3个核苷酸代表一个氨基酸的原则，依次合成一条多肽链的过程。 蛋白质分子氨基酸的排列顺序是严格按照蛋白质的编码基因中的碱基排列顺序决定的。 基因的遗传信息在转录过程中从DNA转移到mRNA，再由mRNA将这种遗传信息表达为蛋白质中氨基酸顺序的过程叫做翻译。 翻译过程是蛋白质分子生物合成的过程，此过程需200多种生物大分子参加，包括核糖体、mRNA、tRNA及多种蛋白质因子。 　mRNA----模板 rRNA----构成核糖体作为蛋白质合成场所 tRNA----搬运工具 氨基酸----原料 蛋白质因子----起始因子IF、延伸因子EF、 释放因子RF等 酶----氨基酰-tRNA合成酶、转肽酶、转位酶 　　　　　等。 无机离子----Mg++ 　一. 遗传密码——三联子 1、遗传密码概况 原核细胞中每种mRNA分子常带有多个功能相关蛋白质的编码信息，以一种多顺反子的形式排列，在翻译过程中可同时合成几种蛋白质。 真核细胞中每种mRNA一般只带有一种蛋白质编码信息，是单顺反子的形式。 　一. 遗传密码——三联子 mRNA分子上以5‘→3’方向,从AUG开始每三个连续的核苷酸组成一个密码子。 ４种碱基＝４３ ＝ 64种密码子→20种氨基酸﹢起始密码﹢终止密码 每种氨基酸有至少一种密码子，最多的有6种密码子。 2、三联子密码及其破译 50-60年代破译遗传密码方面的三项重要成果： （1）Paul Zamecnik等人证实细胞中蛋白质合成的 　　　场所。他们把放射性标记的氨基酸注射到大　　 　　　鼠体内，经过一段时间后收获其肝脏，进行 　　　蔗糖梯度沉淀并分析各种细胞成份中的放射 　　　性蛋白质。??? 2、三联子密码及其破译 50-60年代破译遗传密码方面的三项重要成果： １．如果注射后经数小时（或数天）收获肝脏，所 　　有细胞成份中都带有放射性标记的蛋白质。 ２．如果注射后几分钟内即收获肝脏，那么，放射 　　性标记只存在于含有核糖体颗粒的细胞质成份中。 2）Francis Crick等人第一次证实只有用三联　子密码的形式才能把包含在由AUGC四个　字母组成遗传信息（核酸）准确无误地翻　译成由20种不同氨基酸组成的蛋白质序列，　实现遗传信息的表达。 实验1:??? 用吖啶类试剂（诱导核苷酸插入或丢失）处理T4噬菌体rII位点上的两个基因，使之发生移码突变（frame-shift），就生成完全不同的、没有功能的蛋白质。 实验2:??? 研究烟草坏死卫星病毒发现，其外壳蛋白亚基由400个氨基酸组成，相应的RNA片段长1200个核苷酸，与密码三联子体系正好相吻合。 实验3:??? 以均聚物为模板指导多肽的合成。 在含有tRNA、核糖体、AA-tRNA合成酶及其它蛋白质因子的细胞抽提物中加入mRNA或人工合成的均聚物作为模板以及ATP、GTP、氨基酸等成分时又能合成新的肽链，新生肽链的氨基酸顺序由外加的模板来决定。 实验4:??? 　以特定序列的共聚物为模板指导多肽的合成。以多聚二核苷酸作模板可合成由2个氨基酸组成的多肽.?  5…UGU GUG UGU GUG UGU GUG…3‘ 　不管读码从U开始还是从G开始，都只能有UGU（Cys）及GUG（Val）两种密码子。 实验5:??? 以共聚三核苷酸作为模板可得到有3种氨基酸组成的多肽。如以多聚（UUC）为模板，可能有3种起读方式： 5’…UUC UUC UUC UUC UU