发酵培养基灭菌new.pptVIP

第三章 发酵工业原料及其处理 第一节 培养基的成分及来源 第二节 培养基的类型及选择 第三节 淀粉水解糖的制备 第四节 发酵培养基灭菌 在发酵生产中，为什么要进行灭菌操作？ 1、由于杂菌的污染，使生物反应中的基质或产物因杂菌的消耗而损失，造成生产能力的下降； 2、由于杂菌所产生的一些代谢产物，或在染菌后改变了培养液的某些理化性质，使产物 的提取和分离变得困难，造成收率降低或使产品的质量下降； 3、杂菌会大量繁殖，会改变反应介质的PH值，从而使生物反应发生异常变化； 4、杂菌可能会分解产物，从而使生产过程失败； 5、发生噬菌体污染，微生物细胞被裂解，而使生产失败，等等 发酵培养基灭菌 一、灭菌的原理和方法 二、湿热灭菌原理 三、培养基的湿热灭菌方式 四、灭菌时间计算与影响因素 二、湿热灭菌原理 某些微生物的相对热阻。 在一定温度下，微生物的受热死亡遵照分子反应速度理论。在灭菌过程中，微生物的死亡速率与任一瞬时残存的活菌数成正比,对数残留定律。 上面说过，当培养基被加热灭菌时，常会出现这样的矛盾，这就是，加热时，微生物固然会被杀死，但培养基中的有用成分也会随之遭到破坏，那么有何良策可以既达到灭菌要求，同时又不破坏或尽可能少破坏培养基中的有用成分呢？ 实践证明，在高压加热的情况下，培养基中的氨基酸和维生素极易被破坏，如在121℃，仅20min，就有59%的赖氨酸和精氨酸及其他碱性氨基酸被破坏，蛋氨酸和色氨酸也有相当数量被破坏。因此，必须选择一个既能满足灭菌需要，又可使培养基的破坏尽可能养活的灭菌工艺条件。 3、影响灭菌的因素 培养基中氢离子浓度对灭菌的影响 培养基中氢离子浓度直接影响灭菌的效果。培养基的 酸碱度越大，所需杀灭微生物的温度越低。 三、生产上培养基的灭菌方法 （一）分批灭菌 　　概念：先将输料管内的污水放净并冲洗干净将配制好的培养基输入发酵罐、种子罐或补料罐，用蒸汽直接加热，达到灭菌要求的温度和压力后维持一定时间，再冷却至发酵要求的温度，这一工艺过程称分批灭菌（实罐灭菌） 　　优点：设备要求低，操作简便 　　　　缺点：营养成份有损失 　　　　　　　罐利用率低 　　　　　　　不能采用高温快速灭菌工艺 事故 2002年9月5日衡阳市某啤酒厂酿造车间一台容积100m3的不锈钢发酵糖在清洗过程中发生收缩变形而吸瘪，造成直接经济损失22万元的重大设备事故。 50m3发酵罐失稳事故分析 1事故情况 1998年安阳市某化工厂车间一台50m3发酵罐在空罐消毒后水冷却过程中突然失稳。无伤亡事故，直接经济损失20余万元。 2事故原因分析 现场勘察发现，该罐进汽口和出汽门阀门关闭。冷却水阀门敞开。这说明，失稳是在冷却过程中发生的。 许用压力计算 100℃以下罐体就会承受外压。外压值等于大气压与水的饱和蒸汽压之差。70℃以下水的饱和蒸汽压与罐内负压值见附表。 实测筒体许用外压力0.0832MPa。 比较上表不难看出，当罐内温度降到60 ℃以下后，罐体失稳随时都有可能发生。 3、分批灭菌的注意事项 1）各路蒸汽进口要畅通，防止短路逆流；罐内液体翻动要剧烈，以使罐内物料达到均一的灭菌温度。 2）排气量不宜过大，以节约蒸汽 3）灭菌将要结束时，应立即引入无菌空气以保持罐压，然后开夹套或蛇管冷却，以避免罐压迅速下降产生负压而吸入外界空气，或引起发酵罐破坏。 4）在引入无菌空气前，罐内压力必须低于过滤器压力，否则培养基将倒流入过滤器。 该流程的加热和冷却时间比喷射加热连续灭菌流程要长些，但由于在培养基的预热过程同时也起到了灭菌后培养基的冷却，因而节约了蒸汽和冷却水的用量。 连续灭菌和分批灭菌比较具有很多优点，尤其是当生产规模大时，优点更为显著 当培养基中含有固体颗粒或培养基有较多泡沫时，以采用分批灭菌为好，因为在这种情况下用连续灭菌容易导致灭菌不彻底。 对于容积小的发酵罐，连续灭菌的优点不明显，而采用分批灭菌比较方便。 四、发酵设备灭菌 （1）发酵罐灭菌（空消） 灭菌压力：0.147—0.18MPa，45—60min。 注意事项：空消后，先用无菌空气保压，灭菌的培养 基、相关物料输入罐内后，打开冷却系统进行冷却。 （2）附属设备的灭菌 分空气过滤器：发酵罐灭菌之前灭菌，灭菌后空气吹干备用。 补料系统：根据补料不同而异。 补料管路：与补料罐同时灭菌，保温时间1小时。 消沫剂系统：蒸汽压力0.15MPa，保温30分钟。 消沫剂管路：与补料罐同时灭菌，保温时间1小时。 移种管路：蒸汽压力0.30—0.45MPa，保温时间1小时。 (二)培养基的连续灭菌（连消）