开题报告(石斛与端粒).pptVIP

端粒酶反应条件的探索 * Company Logo LOGO Company Logo LOGO Company Logo LOGO 端粒长度及端粒酶活性与石斛年龄关系的研究 报告人：吴劲松 指导老师：丁小余 教授 二、国内外的研究现状 五、可行性分析/实验进度计划 论文选题的理由或意义 三、研究目标 四、研究内容（详） 主要内容 一、论文选题的理由或意义 石斛，兰科植物之一，主要分布于亚洲热带和亚热带；对生长条件要求极其苛刻，分布在崇岭、悬崖峭壁之上，自然繁殖率极低。千百年来，铁皮枫斗一直作为“九大仙草”之首，和灵芝、人参、冬虫夏草等一并被列为上品中药；另外，其花也可作观赏之用 石斛与端粒（酶） 因此，研究石斛属的代表植物（细茎石斛、铁皮石斛、金钗石斛）的端粒长度和端粒酶活性，为鉴别石斛的年龄提供了有力的科学依据。 1 石斛的一般寿命在十年左右；石斛的药用部位是茎（不像人参的根），在一个生命周期中，其第三年是药用价值最高的时间段（来源互联网）。 2 研究表明，植物细胞端粒长短和端粒酶活性与植物寿命有直接或间接地联系。 二、国内外的研究现状 在植物中,生殖器官和正在分化的组织如脱分化的愈伤组织,端粒酶表达量较高,但是在大多数进行有丝分裂的营养器官中表达量较低或者检测不到端粒酶活性 Fitzgerald等人和Heller-Uszynska等人分别发现了拟南芥和水稻的TERT（端粒酶逆转录酶）基因 银杏和狐尾松等长寿植物进行了端粒和端粒酶研究，其结果均表明：植物的不同生长阶段其端粒长度和端粒酶活性是不同的，并具有一定的正相关性 二十世纪初 Flanary, 2006 近些年 端粒和端粒酶的研究主要集中于动物细胞（尤其肿瘤细胞） 有关石斛的端粒和端粒酶活性的研究，国内外未从报道。 TWO THREE ONE . . 为野生石斛的年龄预测提供科学理论指导 提取三种石斛植物（三种生长阶段）的不同器官端粒酶并进行活性检测。 三、研究目标 测量出三种石斛属植物（三种生长阶段）不同器官的端粒长度(TRFL) 四.研究内容 探究端粒酶活性的最佳条件 用CHAPS裂解液分离细胞的蛋白酶，并做考马斯亮蓝蛋白定量测定 1.端粒酶提取 2.端粒酶反应 端粒酶反应的改进 FACTOR B E C D A 温度（端粒酶延伸阶段） dNTP浓度 引物筛选 染色方法 PCR样品浓度 端粒酶蛋白的提取及检测 引物设计 端粒酶延伸、加尾、PCR扩增 聚丙烯酰胺电泳 材料采集，种质保存 试验路线图 石斛端粒长度检测 基因组总DNA的提取（CTAB） Hinfl酶切检测 southern杂交法测定端粒长度 软件分析（TELOMERIC） 材料采集，种质保存 石斛端粒酶活性检测 与石斛寿命关系分析 五.可行性分析 1.试验材料俱全。 2.试验器材和试验技术在本实验室已熟练掌握，Southern杂交现有文献指导。 3.本人已联系到北京林业大学的师兄、师姐。 综上，虽然本实验室未曾做过相关领域研究，但经过我的努力和不断摸索，一定会有所收获 * Company Logo Company Logo Company Logo