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产纤维素酶霉菌的分离和筛选 班级:09生物技术 指导老师：黄志华 组别: 第五小组 组员：吴志娟、戴剑鹤、柯佳宝、潘凯仑、王志辉 （24-29号） 组长：吴志娟 一．实验目的 1.进一步复习生物化学、微生物学等相关专业知识。 2.掌握产纤维素酶细菌的筛选、纯化和保藏的方法。 3.学会设计实验计划。 4．综合培养动手操作能力及创新精神。 二. 实验原理 纤维素（cellulose）作为植物光合作用的主要多糖类产物，是高等植物细胞壁的主要成分，是公认的自然界数量最丰富、最廉价的可再生有机物质资源,透明圈直径和鉴定板孔径大小的比值能够直接反映该霉菌产纤维素酶的能力,其原理是刚果红是一种能够和大分子多糖相结合的染色剂,染色之后能和纤维素结合形成红色,产纤维素酶霉菌在培养基平板上培养后产的生纤维素酶将纤维素水解成葡萄糖纤维二糖,在用刚果红染色之后没有被水解的纤维素能够和刚果红结合显红色,而水解的部位则不能和刚果红结合而出现透明圈。 三．实验器材与试剂 1.样品：后山植物林地土壤，于地下8cm左右。 2.培养基： （1）富集培养基：配制查氏硝酸钠g 、磷酸氢二钾1g 硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.5g 氯化0.5g 、硫酸亚铁0.01g 蔗糖30g 琼脂20g 加水1000mL(CMC—Na培养基): 羧甲基纤维素钠(CMC—Na) 15g、NH4NO3 1g、酵母膏1g、Mg