棉铃虫对双价（BtCpTI）抗虫棉抗性筛选及其抗性机理的初步的研究.pdf

摘要 棉铃虫Helicoverpa 国连年暴发，对我国棉花生产的稳定发展构成极大威胁。转基因棉的大面积推广种植有效的控制 了棉铃虫的暴发危害。由于转基因棉花在整个生育期都连续表达毒蛋白，从而使棉铃虫一直处于 毒蛋白的持续选择压力下，棉铃虫对抗虫棉的抗性风险已经成为影响其使用寿命的关键因素。棉 铃虫的室内抗性筛选，可以得到棉铃虫抗性种群，为抗性机理的研究打下基础。调查田间棉铃虫 对转基因抗虫棉的敏感性水平，检测田间低水平的抗性基因频率，将为抗性治理策略的制定和实 施提供可靠的依据。本文使用转基因棉花的种子粉作为毒蛋白来源对棉铃虫进行了室内筛选：研 究了抗性棉铃虫体内酶系活力的变化；对2007年山东安丘、河北保定和河南安阳的田间棉铃虫 种群对CrylAc的抗性基因频率进行了估算。 1、棉铃虫室内抗性种群的筛选 选的棉铃虫品系作为对照。用转双价基因棉筛选的棉铃虫品系为AYBC，用转单价基因棉筛选的 育进度为6．0—7．0，饲喂常规棉的棉铃虫AYCK品系发育进度为11．O左右，使用同一剂量对棉铃 虫进行筛选，发育进度有上升趋势。本研究为研究棉铃虫抗性产生机理奠定了基础。 2、转基冈棉对棉铃虫几种主要酶系活性的影响 研究了转双价基因棉(中41)，转单价基因棉(中44)对棉铃虫幼虫中肠内解毒酶、保护酶 和中肠蛋白酶的活性的影响，测定比较了12代连续取食含有转基因棉种子粉的人工饲料的棉铃 虫中肠三种酶系的活性。研究表明，Q一乙酸萘酯酶和谷胱甘肽．S．转移酶活性在双价和单价品系 中均有所下降，其中在双价品系中检测不到谷胱甘肽一S．转移酶活性。保护酶系的活性差异不显著。 总蛋白酶的活性差异不显著，在双价和单价品系中强碱性类胰蛋白酶的活性高于对照品系，分别 为对照品系的3．00倍和4．00倍，弱碱性类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶的活性显著低于对照品系。 3、不同地区棉铃虫种群对CrylAc制剂MVPII粉剂的敏感性差异 用毒蛋白涂表法测定了2006年和2007年山东安丘、河北保定和河南安阳的棉铃虫田问种群 对CrylAc的敏感性水平，结果表明三个种群之间对C巧IAc的敏感性差异不显著，相对敏感性指 数均为敏感品系的1．1—1．7倍，说明三个地区棉铃虫田问种群对CrylAc还没有产生明显的抗性。 4、棉铃虫田间种群对CrylAc抗性基因频率的估算 对2007年山东安丘，河北保定和河南安阳的田间棉铃虫种群进行了抗性基因频率估计。经 检测，2007年山东安丘种群的抗性基冈频率为1．7×103，河北保定种群的抗性基因频率为2．0× 103，河南安阳种群的抗性基因频率为0-2．9×lff3，由田间监测的结果可知，目前大田棉铃虫确 实有一小部分个体对CrylAc的敏感性降低，但三个地区的种群对CrylAc还未产生明显抗性，抗 性基因频率处于正常水平。棉铃虫对Bt抗虫棉的抗性风险依然存在，需要尽快启动全国性的早 期抗性检测和预警』=作。 关键词：棉铃虫，转叔价基因棉，抗性，机理 Abstract Thecotton oneofthemostserious bollworm,Helicoverpaarmigera(Hfibner)，is agriculturalpests worldwide．Itwascharacterizedwithwideharmful andwell scope，greatreproductivepotential environmental cotton an roleinthe adaptability．Thetransgenicplayedimportant comprehensive ofcotton cotton the ActoxinfromBacillus preventionposts．TransgenicexpressingCryl thudngiensis hasbeen inChinasince1 997．HoweveLcottonshowsin