HPV16L1%5cE7+L2%5cE7疫苗构建及在毕赤酵母中的表达和HPV16L1%5cE7疫苗的免疫原性的初步的研究.pdfVIP

囝麓嬲步毒硕士研究生论文 中文摘要 宫颈癌是女性死于恶性肿瘤的重要因素。研究证明90％左右的宫颈癌的组织 可以检测到HPVl6亚型，HPVl6型与鳞癌有着密切关系，而90％的宫颈癌为鳞 癌，所以HPVl6是女性宫颈癌发病的主要原因。 巴斯德毕赤酵母表达系统是现目前广泛应用的异源蛋白真核表达系统，其具 有稳定性好、表达高效、分泌量大、规模化容易和成本低廉等优点，且具有糖基 化等翻译后修饰功能。 本研究主要开展了以下几方面工作：①克隆HPVl6L1／E7和L2／E7基因及 发酵罐规模下建立了HPVl6L1／E7发酵工艺；④研究该疫苗的免疫原性和抗肿瘤 效果。主要研究结果如下： 的构建 pPIC9k-L2／E7克隆质粒，经酶切鉴定和测序鉴定方法验证，证明克隆质粒构建 成功。 ‘二、稳定高效分泌表达毕赤酵母菌种的筛选与鉴定 1．毕赤酵母感受态的制备及电转化(按照毕赤酵母表达手册操作进行)。确 证实后，线性化重组质粒，电转化毕赤酵母菌株GSll5。 2．重组毕赤酵母菌种的筛选。在MM和MD培养基上确定其生长表型；然 行PCR鉴定。 @麓嘲虫孥硕士研究生论文