第一章细胞培养的设施与基本条件.pptVIP

复习细胞工程概念 课前思考？ 到目前为止，同学们都学习了哪些专业实验？ 植物学实验 动物学实验 生物化学实验 微生物实验 细胞工程实验室与这些常规实验室相比较的主要区别是什么？ 动物细胞工程实验室要求严格保持无菌环境，避免微生物及其他有害因素的影响。 应能进行六方面的工作：无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。 1．储藏室 主要存放各类冰箱、干燥箱、液氮罐、无菌培养液、培养瓶等，此环境也需要清洁无尘。 还用来储藏什么？ 要求：取放方便。还有什么要求？ 2.清洗和消毒灭菌室 清洁和消毒灭菌室应与其他区域分开，主要进行所有实验动物材料的处理、细胞培养器皿的清洗、准备、消毒及三蒸水制备等工作。 应满足哪些要求？ 3．制备室 在该区主要进行培养液及有关培养用的液体等的制备。 应具备什么要求？ 4.无菌操作室 相对密封、防尘、防菌的工作空间，在结构和消毒方面都有具体要求。 更衣室： 缓冲间 无菌操作室 a 更衣室:供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。要求 b 缓冲间:位于更衣间与操作间之间，目的是为了保证操作间的无菌环境，同时可放置恒温培养箱及某些必需的小型仪器。 c 无菌操作室:专用于无菌操作。 5.培养与观察室 本区对无菌的要求虽不比无菌区严格，但仍需清洁无尘，因此也应设置在干扰少而非来往穿行的区域。孵育可在孵箱或可控制温度的温室中进行，后者费用高，一般实验室多采用孵箱进行工作。 清洗室: 制备室： 灭菌室： 接种室： 培养室： 鉴定室： 驯化移栽室： 细胞工程实验室它必须满足三个基本的需要，即： ?实验准备室； ?无菌操作室； ?控制培养室。 实验室设计 从总体上来分，实验室主要分为两类： ?基本实验室： ?辅助实验室： 我系细胞工程实验所涉及的实验室现状 506 507 608 609 612 314 课后作业 细胞工程实验室与一般实验室的结构区别是什么？请同学们参观完我系现有细胞工程实验室后，从细胞工程实验室结构设置方面对我系现有细胞工程实验室的改建工作提出可行性的建议或意见？ 一、动物与植物细胞工程实验室通用的仪器设备 1.培养器皿： 培养瓶、培养皿、多孔培养板 2.盛装器皿： 3.计量器皿： 4.超净工作台（净化台） ?净化台的工作原理 利用鼓风机驱动空气通过高效滤器除去空气中的尘埃疯粒，使空气得到净化。 ?分类 ④净化工作区内不应存放不必要的物品，以保持洁净气流型不受干扰。 ⑤一般情况下，高效过滤器三年更换一次。更换高效滤器应请专业人员操作，以保持密封良好。要定期将粗过滤器中的过布（无纺布）拆下清洗，时间应根据环境洁净程度而定，通常间隔3~6个月进行一次。 ⑥每次使用净化台要及时清除工作台面上的物品，并用洒精擦洗台面使之始终保持洁净。 ?分类 ?使用超净工作台应注意的几点问题 ①超净工作台最好安装在无尘的房间内，最好为隔离好的无菌间内，以免尘土过多易使滤器阻塞，降低净化效果，缩短使用寿命。 ②新安装的或长期未使用的工用台，工作前必须对工作台和周围环境用真空吸尘器或不产生纤维的工具进行清洁工作，再采用药物灭菌法或紫外线灭菌法进行灭菌处理。 ③每次使用工作台时，应先用75%酒精擦洗台面，并提前以30~50min紫外线灭菌灯处理净化工作区内积累的微生物。在关闭紫外灯后应启动送风机使之运转两分钟后再进行培养操作。 11.磁力搅拌器 12.电子天平 13.pH计 14.移液设备 根据密封程度的不同,将生物安全分为四个等级,即: P1、P2、P3、P4 一级生物安全标准，其基本要求是： 1、限制随便出入实验室； 2、操作前后要消毒； 3、不能用口吸取液体； 4、禁止在室内进食、吸烟和存放食品； 5、操作时着专门实验服； 6、处理细胞前后要洗手； 7、操作时在超净工作台。 作业 自动双重纯水蒸馏器的构造和使用方法和意事项 压力蒸气消毒器的使用方法，物品存放和消毒要求 电热恒温培养箱、电热恒温干燥箱