ALVJgp85重组蛋白亚单位疫苗的制备及其免疫条件的优化.pdfVIP

本研究得到国家农业部公益性行业(农业)科研专项经费 资助 (项目编号：201203055) 符号说明 目录 中文摘要………………………………………………………………………………………．I Abstract……………………………．……………．………………………………………………………………………………．．】][【 1．引言…………………………………………………………………………………………………．1 1．1 J亚群禽白血病的概述…………………………………………………………………………。1 1．1．1 ALV．J生物学特征及其基因结构……………………………………………………。1 1．1．2 ALV—J流行病学…………………………………………………………………2 1．1．3 ALV．J的致病性及危害性……………………………………………………………．．3 1．1．4 ALV．J的诊断检测方法…………………………………………………………………4 1．1．5我国ALV．J的防治现状及禽白血病的发展趋势…………………………………．5 1．2疫苗、基因工程亚单位疫苗及基因工程亚单位疫苗佐剂的概述…………………7 1．2．1疫苗的概念、种类、作用及应用现状……………………………………………7 1．2．2基因工程亚单位疫苗的概念、种类、作用及应用现状………………………………8 1．2．3基因工程亚单位疫苗佐剂的概念、种类、作用及应用现状……………………．10 1．3 ALV．J疫苗的研究进展…………………………………………………………………12 1．4本研究目的和意义…………………………………………………………………………12 2．材料与方法………………………………………………………………………………．．13 2．1试剂与仪器……………………………………………………………………13 2．1．1主要试剂……………………………………………………………………………………．．13 2．1．2仪器及耗材…………………………………………………………………………………17 2．1．3实验地点………………………………………………………………………．．18 8 2．2实验方法………………………………………………………………………………………1 2．2．1重组gp85蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化…………………………………………18 的研究…………………………………………………………………………………………．．22 …．……………．…．…．………．…．．…．…．．……．…．…．……．…………．…．．……．…．………．…………………．…．…．…．…．…．…．23 2．2．5数据处理…………………………………………………………………………………一25 3．结果…………………………………………………………………………………………………………………………．．25 3．1ALV-J gp85蛋白的诱导表达、纯化及免疫原性鉴定………………………………25 3．2不同剂量CpG与』蛆Ⅳ-Jgp85重组蛋白免疫诱导海兰褐种母鸡血清抗体和母源抗体 的研究………………………………………………………………………………………………．26 3．2．1不同剂量CpG与ALV-Jgp85重组蛋白免疫诱导海兰褐种母鸡血清抗体的变化．26 3．2．2不同剂量CpG与mⅣ-Jgp85重组蛋白免疫诱导海兰褐种母鸡血清抗体阳性鸡只比 率的变化…………………………………………………………………………………………．27 3．2．3不同剂量CpG与ALV—Jgp85重组蛋白免疫诱导海兰褐母鸡卵黄抗体的变化…28 ……………………………………………………………………………………………………………………………………………：19 3．3．1不同剂量Cry3与ALV—Jgp85重组蛋白免疫诱导农大三号成年母鸡血清抗体的变化 ……………………………………………………………………………………………………………………………………………：19 3．3．2不同剂量CpG与ALV-Jgp85重组蛋白免疫诱导农大三号成年母