尼古丁增强树突状细胞功能的机制的研究.pdfVIP

摘要 摘要 树突状细胞(DCs)是功能最强的专职抗原递呈细胞(APC)，可以诱导抗 原特异性的CTL反应。有研究报道，在小鼠实验中DCs联合负载抗原肽可以 预防和治疗肿瘤。近年，尼古丁已经成为神经退行性疾病、结肠癌和唐氏综合 症的治疗性药物。我们的前期研究发现尼古丁处理的未成熟树突状细胞 (iInDCs)具有抗肿瘤效应，但并未对尼古丁增强DCs功能的机制进行深入探 讨。本研究首先以尼古丁刺激自骨髓诱导的imDCs，分别以流式细胞术、Wrestem B10t和ImPCR检测尼古丁刺激对DCs表达CDl1c、酊IAchR、4．1BBL和 oX40L的影响；其次，以Brdu掺入试验和ELISA分别检测尼古丁刺激对DCs 介导的抗原特异性T细胞增殖反应和IL．12分泌的影响；再以BrdU掺入试验 DCs功能中的作用及肿瘤预防作用；继以信号通路抑制剂，通过W|estemBlot和 BrdU掺入试验分别检测了尼古丁上调DCs表面分子a7nAChR、4．1BBL和 OX40L表达的机制；最后以BrdU掺入试验和ELISA对比评估了尼古丁和lFN吖 对DCs功能的增强效果。 CDllc、a7I认ChR 结论如下：第一，在蛋白水平，尼古丁刺激可以上调DCs 和OX40L的表达，而尼古丁刺激DCs在蛋白水平和n1】心『A水平都能增加 4．1BBL表达；第二，尼古丁刺激能够增强抗原特异性T细胞增殖反应及IL．12 分泌；第三，封闭CD80、CD86和4．1BBL的作用均能有效逆转尼古丁对DCs 介导的T细胞增殖反应、CTLs诱生和抗肿瘤功能；第四，尼古丁能快速激活 酸化；第五，尼古丁主要通过P13l㈨kt信号通路一卜调0【7l认ChR、4．1BBL和 OX40L表达，ME舳rk信号通路也参与了上调4．1BBL表达；最后，我们发现 尼古丁和2n咖lIFN吖在DCs介导的T细胞增殖反应中有同样的效果。上述 结果均预示尼古丁刺激的DCs能够成为抗肿瘤和抗病毒感染的新式免疫疗法， 我们的研究为尼古丁刺激DCs应用于临床治疗提供了理论依据。 关键词：尼古丁树突状细胞免疫治疗 II Abstract AbstraCt Dendritic oneofthe cells(DCs)areimportantantigenpresentingcells(APC) f．0rinducingantigenic-specificc”otoxic thatDCsloadedwith haVeshowed couldinduce and r印ons antigens therapeutic that anti-tumor inmice．Sevemlhavedocumented protectiVe imm帅ity groups inthen℃atmentof niCotinehas efrects diseases， positive neurodegeneratiVe ulcerativecolitisandTburette smdieshaVerevealed syndromem．Ourprevious thatnicotine-仃eatedimmatL鹏dendritic e疵cts．