临床PCR检验标本处理、保存与核酸提取方法.pptVIP

临床PCR检验标本的处理、保存及核酸提取方法 卫生部临床检验中心 李金明 临床标本的正确采集、运送、保存的重要性 临床检验的质量保证关键性环节 解决涉及实验室检验的医患纠纷的方法之一 核酸提取的重要性 核酸提取是临床PCR检验最为关键的部分，亦是手式操作的主要部分 核酸提取的成败关系到临床PCR检验的正确与否 临床PCR检验操作中最易出问题的环节 标本采集 标本采集时间对扩增检测结果的影响 标本采集部位的准备 标本的类型和采集量 采样质量的评价 采样及运输容器 标本采集中的防污染 标本运送 样本一经采集，则应尽可能快的送至检测实验室。 样本中如加入了适当的稳定剂,如用于RNA测定加入GITC的血清(浆)样本和用于DNA测定的EDTA抗凝血等,则可在室温下运送或邮寄。 实验室应根据待测靶核酸的特性，对各种临床样本的运送条件作出相应的规定。 临床标本的处理和保存 血清（浆） 全血 外周血单个核细胞 痰 棉拭子 脓液 体液 乳汁 组织 血清（浆） DNA测定，可按照一般的血清标本处理程序，对测定影响不大。 RNA测定，标本的获取和保存方式对测定结果，可能有决定性影响。最好是使用EDTA抗凝(严禁使用肝素，因其对PCR扩增有抑制，且很难在核酸提取过程中完全去除)全血标本，抗凝后6小时内分离血浆，如使用血清标本，则需尽快(2小时内)分离血清，标本