东方田鼠抗日本血吸虫相关靶基因的筛选、克隆和表达.pdf

摘 要 血吸虫病是世界性分布的、危害最为严重的人畜共患寄生虫病之一。东方田鼠对血吸虫具有 天然抗性。探索东方田鼠抗日本血吸虫机理，筛选东方田鼠抗日本血吸虫抗性相关基冈或靶基因， 对研制抗日本血吸虫疫苗和治疗药物具有重要借鉴意义。 本研究首先比较东方田鼠组织器官／裂解物及血清、灭活血清对体外培养日本血吸虫童虫的杀 伤效果，然后选用杀伤力较高的肝脏和肺脏裂解物分别亲和淘洗筛选日本血吸虫成虫(Sj44d)噬 菌体展示cDNA文库，对获得的部分阳性克隆进行序列测定、生物信息学分析、免疫保护效果评 估、全长序列的克隆和表达。 1、将东方田鼠肝脏裂解物、肺脏裂解物、脾脏裂解物、肌肉裂解物、血清和灭活血清分别 与日本血吸虫机械断尾童虫在体外共培养，在培22h，童虫死亡率分别为33．51％、36．33％、3．92％、 86．14％和83．14％。研究结果显示，除已有报道东方田鼠血清对体外培养血吸虫具有较高的杀伤 作用外，本研究发现肺脏、肝脏作为血吸虫移行、发育的承载器官，其组织裂解物对血吸虫也表 现显著的杀伤作用引人注目，对深入探究东方田鼠抗日本血吸虫机理有重要意义。 2、用肝脏裂解物和肺脏裂解物分别筛选日本血吸虫成虫(Sj44d)噬菌体展示cDNA文库， 经过三轮筛选后，