Cyclophilin+A在巨噬细胞荷脂过程中的表达改变及其普罗布考干预的影响.pdf

中文摘要 CyelophilinA在巨噬细胞荷脂过程中的表达改变 及普罗布考干预的影响 研究生：涂剑 导师：廖端芳教授 严鹏科博士 专业：药理学 A在OX．LDL诱导的巨噬细胞荷脂过程中表达的改变及 一、Cyclophilin 其影响 目的通过ox-LDL诱导的巨噬细胞荷脂化模型，观察胆固醇转运复合物中关键蛋白 析CyclophilinA在巨噬源性荷脂细胞形成过程中的作用。 A和 Caveolin．1蛋白的表达改变；油红O染色观察细胞内脂滴的形成情况；高效液相色谱 法检测细胞内胆固醇含量变化；放射性同位素法检测细胞内胆固醇流出情况。 同时，胆固醇转运复合物中另一关键蛋白Caveolin．1蛋白的表达，与未处理组比较， A与 Caveofin-1在胞膜、胞浆中的表达，且随着处理时间的延长，作用更明显。油红O染 色显示在OX．LDL处理细胞48小时后，细胞内有大量脂滴的形成，细胞内总胆固醇含 ±0．59％和lO．77±0．35％。P均O．05，差异有显著性。 A与Caveolin一1 结论ox-LDL诱导的RAW264．7巨噬细胞荷脂化过程中，Cyclophilin 的表达下调与细胞胆固醇蓄积密切相关。 A表达的影响及其对细胞内胆固醇蓄积的作用 A表达 目的观察抗氧化剂普罗布考对OX—LDL诱导巨噬细胞荷脂过程中Cyclophilin 的影响及其对胆固醇蓄积的作用，从一个新的角度探讨普罗布考的抗动脉粥样硬化作 用。 O染色观察细胞内脂滴的形成情况；高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量变化；放 射性同位素法检测细胞内胆固醇流出情况；Western-blot、免疫荧光分别定量、定位 与Caveolin．1的相互影响，分析普罗布考对ox-LDL诱导巨噬细胞荷脂过程中 A、Caveolin-1表达及胆固醇转运复合物形成的影响。 Cyelophilin 结果用75mg／L ¨g／mg蛋白，胆固醇酯／总胆固醇的比值为42．3+5．9％：细胞内胆固醇流出率降至 12．94±O．59％；予普罗布考处理后，细胞内脂滴明显减少，细胞内总胆固醇含量减少 与Caveolin一1在胞膜、胞浆中的表达。免疫共沉淀的结果显示，普罗布考明显促进细 显著性，P0．05。 A、Caveolin．1的蛋白表达并促进二_：者的相互结合，促进细胞内胆固醇流 Cyclophilin 程。 关键词：脂蛋白，低密度，氧化；亲环索A；小凹蛋白一1；巨噬细胞，荷脂化；普罗 布考 A of in ExpressionCyclophilinLipid—LoadedMacrophages InducedOxidizedLow andProbucol Density by Lipoprotein onCellularCholesterolAccumulation andItsEffect ABSTRACT in