仪器分析.复习.重修.自学.预习8分子发光分析.pptVIP

“备”则“倍” 有准备、有规划的人生更精彩！ ② 温度对荧光强度的影响 温度上升使荧光强度下降。其中一个原因是分子的内部能量转化作用。另一个原因是碰撞频率增加，使外转换的去活几率增加。 ③ 溶液pH值对荧光强度的影响 带有酸性或碱性官能团的大多数芳香族化合物的荧光与溶液的pH有关。不同的pH值，化合物所处状态不同，不同的化合物或化合物的分子与其离子在电子构型上有所不同，因此，它们的荧光强度不同。 ④ 各种散射光 pH的影响 （3）溶液荧光猝灭 荧光物质分子与溶剂分子或其它溶质分子的相互作用引起荧光强度降低的现象称为荧光猝灭。能引起荧光强度降低的物质称为猝灭剂。 导致荧光猝灭的主要类型： ① 碰撞猝灭 碰撞猝灭是指处于激发单重态的荧光分子与猝灭剂分子相碰撞，使激发单重态的荧光分子以无辐射跃迁的方式回到基态，产生猝灭作用。 ② 静态猝灭（组成化合物的猝灭） 由于部分荧光物质分子与猝灭剂分子生成非荧光的配合物而产生的。此过程往往还会引起溶液吸收光谱的改变。 ③ 发生电子转移反应的猝灭 某些猝灭剂分子与荧光物质分子相互作用时，发生了电子转移反应，因而引起荧光猝灭。 4 荧光物质的自猝灭 在浓度较高的荧光物质溶液中，单重激发态的分子在发生荧光之前和未激发的荧光物质分子碰撞而引起的自猝灭。有些荧光物质分子在溶液浓度较高时会形成二聚体或多聚体，使它们的吸收光谱发生变化，也引起溶液荧光强度的降低或消失。 二、荧光分析仪 用于测量荧光的仪器由激发光源、样品池、用于选择激发光波长和荧光波长的单色器以及检测器四部分组成。 为了消除入射光和散射光的影响,荧光的测量通常在与激发光成直角的方向上进行。为消除可能共存的其它光线的干扰，在样品池和检测器之间设置了第二单色器。荧光作用于检测器上，得到响应的电信号。 （1）激发光源 在紫外-可见区范围，通常的光源是氙灯和高压汞灯。 （2）样品池 荧光用的样品池须用低荧光的材料制成，通常用石英，形状以方形和长方形为宜(四面透光)。 （3）单色器 光栅 （4）检测器 由光电管和光电倍曾管作检测器，并与激发光成直角。 三、分子荧光分析法及其应用 1.荧光分析方法的特点 （1）灵敏度高 （2）选择性强 （3）试样量少和方法简单 （4）提供比较多的物理参数 荧光分析法的弱点是它的应用范围小。因为本身能发荧光的物质相对较少；另一方面，由于荧光分析的灵敏度高，测定对环境因素敏感，干扰因素较多。 2. 定量分析方法 （1）校准曲线法 （2）比较法 3. 应用 （1）元素的荧光测定 （2）有机化合物的荧光测定。 四、磷光分析法 分子磷光与分子荧光光谱的主要差别是磷光是第一激发单重态的最低能层，经系间跨越跃迁到第一激发三重态，并经振动弛豫至最低振动能层，然后跃迁回到基态发生的。与荧光相比，磷光具有如下三个特点： （1）磷光辐射的波长比荧光长 分子的T1态能量比S1态低。 （2）磷光的寿命比荧光长 由于荧光是S1 ? S0跃迁产生的，这种跃迁是自旋许可的跃迁，因而S1态的辐射寿命通常在10-7~ 10-9s，磷光是T1 ? S0跃迁产生的，这种跃迁属自旋禁阻的跃迁，其速率常数要小，因而辐射寿命要长，大约为10-4~ 10s， （3）磷光的寿命和辐射强度对于重原子和顺磁性离子敏感。 1磷光分析仪 在荧光分光光度计上配上磷光配件后，即可用于磷光测定。如将样品放在盛有液氮的石英杜瓦瓶内，即可用于低温磷光测定。 2. 应用 磷光分析主要用于测定有机化合物，如石油产品、多环芳烃、农药、药物等方面。 第二节 化学发光分析 某些物质在进行化学反应时，由于吸收了反应时产生的化学能，而使反应产物分子激发至激发态，受激分子由激发态回到基态时，便发出一定波长的光。这种吸收化学能使分子发光的过程称为化学发光。利用化学发光反应而建立起来的分析方法称为化学发光分析法。化学发光也发生于生命体系，这种发光称为生物发光。 一、化学发光分析的基本原理 化学发光是吸收化学反应过程产生的化学能，而使反应产物分子激发所发射的光。任何一个化学发光反应都应包括化学激发和发光两个步骤，必须满足如下条件： （1）化学反应必须提供足够的激发能，激发能主要来源于反应焓。 （2）