实验五 放线菌形态观察.pptVIP

青霉、黑曲霉 培养小室准备（干热灭菌） 无菌操作 半固体察氏培养基分别滴在载玻片两端 接菌种（孢子） 盖上盖玻片 吸入无菌水2-3ml（or 20％甘油） 28度培养 试验报告 1.放线菌的观察（插片法、印片法）绘图 2.霉菌的接种写到下一次试验报告 Filamentous Actinomycetes 丝状放线菌 streptomycete链霉菌 Actinomycete放线菌单克隆 conidiospore分生孢子 由于放线菌的气丝和孢子色暗，基丝呈透明状，菌丝直径和孢子大小与细菌相近，一般为1微米左右，插片法直接观察的菌丝与背景反差度小，分辨率低。 气生菌丝转变分生孢子 Tip curls 顶端卷曲; Partitioning of tip 分隔 ; Cell walls thicken and constrict 细胞壁增厚并收缩; spores mature Flexous ;Fascicled簇生 ; Primitive spirals初始螺旋 ; Open spirals ; Biverticillate 做印片法时，学生很难掌握好力度，压片常过重或过轻，导致镜检时无法看到或看清孢子形态，最终无法完成绘图作业，传统方法的过程和结果容易使学生产生枯燥感［7］加之学生操作和观察的方法与经验欠缺，不容易达到理想效果。 将原两种制片观察法改为一次制片，这样既能观察菌丝形态，又能观察孢子形态 * * * 做印片法时，学生很难掌握好力度，压片常过重或过轻，导致镜检时无法看到或看清孢子形态，最终无法完成绘图作业，传统方法的过程和结果容易使学生产生枯燥感［7］加之学生操作和观察的方法与经验欠缺，不容易达到理想效果。 将原两种制片观察法改为一次制片，这样既能观察菌丝形态，又能观察孢子形态 * 放线菌形态的观察 目的要求 实验材料 实验程序 思考题 目的要求 学习观察放线菌的基本方法 加深理解放线菌的形态特征 实验材料 放线菌培养物：费氏链霉菌（Streptomyces fradiae ）或“5406”产生菌（St. microflacus）细黄链霉菌四天培养物。 显微镜、载玻片、接种环、解剖针、解剖刀、酒精灯、镊子等。 酒精、蒸馏水等。 G＋ GC含量高（和另一类阳性菌——厚壁菌门相比） 好氧、少部分寄生兼性厌氧 放线菌重要的属有： (1)链霉菌属（Streptomyces） 分枝菌丝 孢子体或气生菌丝 菌丝无横隔 好氧 原核生物 降解高分子底物 生长条件简单 抗生素 (2)棒状杆菌属（Corynrbacterium） 谷氨酸棒杆菌（C. glutamicum） 味精生产菌 氨基酸生物合成调节机制 白喉棒状杆菌（C.diphtheriae） (3)分枝杆菌属(Mycobacterium) 不规则杆状菌 抗酸性染色 细胞壁含有大量的脂类和分枝菌酸 结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌 抗生素 链霉素 灰色链霉菌（Streptomyces griseus） 四环素 红霉素 新霉素 庆大霉素 Filamentous Actinomycetes Typical appearance of a streptomycete growing on agar slants The colors are due to the production of pigments Filamentous Actinomycetes Antibiotic action of soil microorganisms on a crowded plate streptomycetes Bacillus 插片法 1.倒平板 2.接种：划线培养 3.插片：无菌操作将盖玻片以大约45度角插入培养基 4.培养 倒置培养28℃ ，通常4－6天 5.镜检 插片法 28℃插片培养4-6d，轻轻取出盖玻片，直接观察镜检。 观察菌丝和孢子丝自然生长的性状，其中包括气生菌丝（较粗）、基内菌丝（较细）和孢子丝的形状，如分枝状况及孢子丝的卷曲等，并绘图说明（本实验采用费氏轮生菌接种后观察 ）。 首先寻找插在培养基的界面分界线，观察营养菌丝、气生菌丝形态及分枝情况。 调节亮度 直接镜检 Filamentous Actinomycetes Stages in the conversion of a streptomycete’s(链霉菌) aerial hypha into spores (conidia) Various types of spore-bearing structures in the streptomycetes Filamentous Actinomycetes Several spore-bearing structures of actin