实验五+放线菌形态观察.pptVIP

实验五 放线菌的插片培养和形态观察 一、实验目的: 二、实验原理 放线菌：  由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体，革兰氏阳性细菌。 菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的营养菌丝（或称基内菌丝）和生长在培养基表面的气生菌丝。有些气生菌丝分化成孢子丝，呈螺旋形、波浪形或分枝状等，其着生形式有丛生、互生和轮生。孢子常呈圆形、椭圆形或杆状。气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为分类的重要依据。 三、实验材料 1.放线菌培养物紫色链霉菌和灰色链霉菌的四天插片培养物。 2.培养基：高氏合成一号培养基 3.显微镜、无菌培养皿、无菌盖玻片、显微镜、酒精灯、接种针、载玻片等。 四、实验步骤 插片培养法：倒平板（将融化的高氏合成1号培养基无菌操作倒平板） 插片（将无菌的盖玻片以大约45°角插入培养基中（9片/皿/组） 接种（无菌操作取灰色链霉菌或紫色链霉菌划线接种于插片和培养基接触处） 培养（将插片平板倒置，28℃培养3~5天） 观察镜检：轻轻地慢慢地逆着插入方向拔出盖玻片，擦去背面培养物，然后将有菌的一面朝下放在滴有美兰的载玻片上，静置后观察。 霉菌的载玻片培养 1、培养小室的灭菌：在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一U形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖，包扎后于121℃灭菌30min，烘干备用。 2、琼脂块的制作：取已灭菌的马铃薯琼脂（或察氏琼脂）培养基6-7ml注入另一块灭菌平皿中，使之凝固成薄层。用解剖刀切成0.5-1cm2的琼脂块，并将其移至上述培养室中的载玻片上（每块放两片）。注意无菌操作 3、接种：用尖细的接种针挑取很少量的孢子接种于琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。接种量要少，尽可能将分散的孢子接种在琼脂块的边缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察。 4、培养：现在平皿的滤纸上加3ml灭菌的20%的甘油（保持湿度），盖上平皿，28℃培养。 五、实验结果 绘图紫色链霉菌和灰色链霉菌基内菌丝和气生菌丝、孢子丝。 六、问题与讨论 1.镜检时，你如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝？P42 ，2（3） 上次试验习题解答 在显微镜下，酵母菌有哪些突出的特征区别于一般细菌？ P43 ，2（2） ① 酵母菌一般以出芽方式进行无性繁殖。 ② 酵母菌的个体大小比细菌大几倍甚至十几倍，在高倍镜下即可观察到。而一般细菌必须在油镜下才能观察到。 如何区别酵母菌的营养细胞和释放出子囊外的子囊孢子？p44，2 酵母菌的营养细胞呈红色，而释放出子囊外的子囊孢子呈绿色。由此可加以区别。? * * 了解放线菌的特点并观察其形态特征 学习掌握放线菌观察的基本方法 放线菌的插片培养 接种位置