大鼠胰腺癌缺血再灌注加微球栓塞分子生物学实验的研究.pdf

华中科技大掌同济医掌院 博士学位re文ml 大鼠胰腺癌的缺血再灌注加微球栓塞的 分子生物学实验研究 前 言 胰腺癌(Pancreaticcarcin。ma)是消化系统较常见的恶性肿瘤，f近年来发病率在 世界范围内呈明显上升趋势，在美国和日本其病死率居全部肿瘤病死率的第四位。 中国上海胰腺癌在20年中增长约6倍，而胰腺癌也是消化系统肿瘤中较难早期诊断 的癌种，它缺乏敏感和特异的诊断指标。在出现腹胀、背痛、黄疸等症状时已属晚 期，肿瘤己向周围脏器浸润，因此手术切除困难。)缸癌的早期诊断，使之能够早 期发现，及时治疗，是改善胰腺癌预后的关键，虽然近年来胰腺癌的影像学诊断技术 取得了较大的进步，但总的预后并未发生显著的改观，目前仍缺少～种较理想的胰 腺癌动物模型供人们探索其发病机理和早期诊断及治疗的方法。本研究旨在探索一 种快速、简便的方法，制作一种符合人体胰腺癌发生发展过程的动物胰腺癌模型。 被膜下胰腺实质内，诱发胰腺癌模型。本题研究大鼠胰腺癌模型的胰腺癌缺血再灌 注对胰腺癌细胞凋亡，细胞因子和基因的影响，为胰腺癌的早期诊断和治疗提供研 究依据。 华中科技大掌间济医学院 博士掌位论文摘要 一—————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————一 ／ (第一部分： 中文摘要 大鼠胰腺癌的动物模型实验研究 目的：绝大多数胰腺癌在诊断时已属中晚期，难以根治性手术切除，预后很差， 因此建立较稳定的胰腺癌动物模型有助于研究胰腺癌发生，恶变程度，增殖和转移 DMBA)置入sD大鼠制作胰腺癌模型，为探索人体胰腺癌发病机理和早期诊断及治 疗的研究奠定基础。 方法：80只SD大鼠(由华中科技大学同济医学院动物实验中心提供，体重150 2h， —200克，雌雄不拘)随机抽样分为A组为正常对照组(n=6)，大鼠术前禁食1 不禁水。术前将2％戊巴比妥钠(1．5ml／kg体重)注入腹腔内麻醉，每只动物均 其 经上腹正中行2cm纵切口进腹。A组动物仅作胰腺尾部被膜实质切开和缝合； 余74只SD大鼠用于胰腺癌模型制作(B组)，暴露胰腺后，于其尾部切开胰腺被膜 在普通环境中饲养大鼠。在3个月内将形成肿瘤大鼠活体取部分肿瘤组织及其周围 组织常规切片应用ABC免疫组化染色方法为(卵白素一生物素一过氧化物酶连结法) 观察导管增生(即导管上皮细胞数目增加以及微乳头生长)，炎症(包括急性，慢性 和亚急性)，异型(包括核推胞浆异常，核仁增大的核细胞，核仁鸟核，但无线粒体 增生)，发育异常(多核，腺体病线粒体增生)，原位瘭等。胰腺肿瘤体积计算采用 以及检测血清淀粉酶和谷丙转氨酶含量。 结果：44只大鼠形成胰腺肿瘤(59％)，其中37只为胰腺导管上皮腺癌，4只 为胰腺腺泡癌，肉眼观察表明癌组织与正常组织边界不清，质地硬，灰白或灰红色： 镜下观察显示癌细胞呈腺管样分布，腺腔大小不一，核异型明显，并可见癌细胞巢 等；3只大鼠出现胰腺纤维肉瘤，胰腺完全消失，被弥漫分布的纤维肉瘤细胞所取代。 在44只大鼠中有5只死于急性出血坏死性胰腺炎，1只死于麻醉过程中，2只因肿 瘤腹膜转移及大量腹水衰竭死亡。 结论：本研究表明直接置入DMBA于胰腺被膜和实质内可在短期内导致较高发 生率的单纯的鼠胰腺癌而不伴有其他组织器官的恶变。这种模型可对研究胰腺癌的 发病机理和早期诊断及治疗有一定的帮助。增生，异型和发育不良的导管细胞是胰 腺癌的先兆：研究这些前体改变有助于早期发现胰腺癌：这些前体表现诊断价值与 肿瘤的诊断价值有同等意义并且对胰腺癌分子生物学机制有更重要意义。／2．／ 关键词：胰腺癌 二甲基苯并葸SD大鼠