新型荧光试剂的合成及其标记方法的研究.pdf

摘要 摘要 荧光衍生化方法是提高色谱检测灵敏度的重要途径。本论文以发展瓤型 荧光试剂及标记方法为目标，制备了多种新型荧光衍生化试剂，并建立了相 应的HPLC分离分析方法。 采用量子化学计算方法，对咔唑和吖啶酮类荧光试剂分子进行了几何构 型优化和荧光激发光谱计算研究。通过设计合理的反应路线，制各了以咔唑 为母体荧光团的新型羰基标记荧光试剂一咔唑一9．乙氧基碳酰肼 光试剂一1，3，5，7-四甲基一8一苯基一(4一氧基一(3-环氧丙基))一二氟化硼一二吡咯甲 l，2一苯并一3，4一二氢咔唑．9．乙基．对甲苯磺酸酯(BDETs)和1，2．苯并．3，4．二氢 可以显著改善样品的分离度和检测灵敏度。 对糖醛类化合物的衍生反应，并发展了相应的HPLC分离分析方法。衍生反 应可在水浴中进行：对甲醛的衍生反应可在30 min内完成；糖类化合物和甲 fiaml。 醛的衍生物平均检出限分别达到35fmol和9．8 种胆汁酸的柱前衍生HPLC分析方法。衍生反应条件温和；两者与胆汁酸衍 fmol。 生物的平均检出限分别达到8r3fmol和149．1 进一步完善了咔唑．9．乙基氯甲酸酯(CEOC)作为实用荧光试剂对脂肪 胺的衍生及HPLC的分离分析方法。衍生反应可在5min内完成；23种衍生 物的分离仅需1h。此外，也将其应用于芳香胺和酚类化合物的分析中，平均 frnol。 捡出限分别达到7,6fmol和162．4 将具有活性环氧基团的荧光试剂TMEPBODIPY和3．环氧丙基荧光素 (EPF)应用于对蛋白质的荧光标记。通过对比实验，证明了这两种试剂可 以对蛋白质进行选择性标记，有望在蛋白质组学研究中发挥重要作用。 关键词：荧光试剂，衍生化，高效液相色谱 Abs订acl Abstraet Lin Zhang(Analytical Chemistry) DirectedProf．YukuiandProf．Lihua by Zhang Zhang wimfluorescent all Derivatization moleculesis of the importantwayincreasing detection of dissertatioinisfocusedonthe sensitivitychromatography．This ofnovelfluorescent and methods．Severn development reagentslabeling fluorescenthavebeen andtherelevantHPLC reagents synthesized methodshave beenestablished． onthe andfluorescence Quantumchemistry study optimizedgeomeMes