c-MET基因异常出现于肺腺癌中的特征及其和EGFR的相关性.pdfVIP

1 目录 c-MET 基因异常出现于肺腺癌中的特征及与EGFR 的相关性 中文摘要3 英文摘要 5 英文缩略表 7 引言 8 材料和方法 9 一、材料9 二、方法 11 三、统计学分析 15 实验结果 16 一、免疫组织化学(IHC) 16 二、荧光原位杂交(FISH) 19 三、实时荧光定量聚合酶链反应(RTFQ PCR) 22 四、实验结果汇总22 讨论 26 一、MET 的表达情况与活化水平26 二、MET 基因拷贝数(GCN)结果讨论27 三、MET 与EGFR 的讨论29 四、临床意义32 结论 33 参考文献34 致谢 37 综述《c-MET 介导肺癌演进及EGFR-TKI 获得性耐药的研究进展》38 2 c-MET 基因异常出现于肺腺癌中的特征及与EGFR 的相关性 摘要 目的 研究 c-MET 基因异常导致的间质表皮转化因子(Mesenchymal-epithelial transition factor ，MET)高表达在肺源性腺癌组织中出现的临床、病理特征；所翻 译蛋白高度持续性磷酸化的样本中c-MET 基因拷贝数(Gene copy number ，GCN 有何异常；c-MET 与表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor ，EGFR) 编码基因突变相关性的分析；不同来源的肺源性腺癌组织c-MET 表达及EGFR 突变情况是否存在差异。 方法 收集 100 例未接受化疗及分子靶向药物治疗患者的肺源性腺癌组织进行以 下实验： 1.采用免疫组化超敏二步法检测100 例MET 蛋白的表达情况及受体胞内段 Tyr1234、Tyr1235 两个位点的磷酸化水平； 2. 从原100 例中选取75 例制成组织阵列，用连续切片制成组织芯片。应用 荧光原位杂交(Fluorescent in situ hybridization ，FISH)技术在组织芯片进行c-MET GCN 检测实验； 3.采用实时荧光定量PCR 法检测100 例样本中EGFR 的29 种突变。 结果 1．c-MET 的表达与活化情况：(1) 肺源性腺癌组织中 c-MET 阳性表达构 成比43.0% (43/100) ；其阳性率与吸烟情况有关(P ＜0.05)，样本内吸烟患者MET 阳性构成比(28.2%)低于不吸烟样本(52.5%) ，MET 阳性与年龄、性别、肿瘤分期、 组织来源无相关性(P ＞0.05) 。(2) MET 磷酸化阳性的构成比2.0% (2/100) ；未发 现与各项统计指标间存在规律。(3) MET 蛋白阳性样本中有 2 例为磷酸化阳性 (2/43) ，染色为强阳性。 2.c-MET 基因拷贝数检测结果(共检75 例，4 例检测失败，明确诊断71 例) ： (1) c-MET GCN 异常构成比14.1% (10/71) ，与M 分期显著相关(P ＜0.05)，M1 期检出率大于M0 期；余各项指标未见明显相关(P ＞0.05) 。(2) c-MET 高度多染 色体性构成比11.3% (8/71) ，其特征同c-MET GCN 异常相似。(3) c-MET 基因 3 扩增2 例，构成比2.8% (2/71) ，且为磷酸化阳性病例；未发现与各项统计指标间 存在规律。 3.EGFR 突变检测结果：肺源性腺癌组织中EGFR 突变52 例，构成比52%， 其中包含3 例T790M 突变。突变率高低与组织来源有关(P ＜0.05)，在胸膜组织 中的突变构成比(84.6%) 明显高于肺(51.1%)及淋巴结组织(21.4%) 。 4. EGFR 突变检测结