急性肺损伤新生大鼠肺上皮细胞内钙离子和肺表面活性蛋白A变化研究.pdf

急性肺损伤新生大鼠肺上皮细胞内钙离子与肺表面活性蛋白A变化的研究 急性肺损伤新生大鼠肺上皮细胞内钙离子 与肺表面活性蛋白A变化的研究 研究生：范伟堂 导师：周晓光教授 中文摘要 目的：本研究拟采用内毒素(LPS)腹腔注射的方法复制新生大鼠 的变化趋势，以探讨钙超载、SP-A在ALI／ARDS发病机制中的作用， 方法：选择6～7日龄的SD大鼠64只，随机分为8组，其中肺损 O．5、1、2、4、8、1 6、24h等时间点分为7组，每组8只；对照 组给予腹腔注射等量的生理盐水，共8只。检测对照组和ALI各 组新生大鼠肺组织湿／干重比值(W／D比值)，并观察肺组织病理学 改变。应用荧光测定法检测肺上皮细胞[Ca2+]i的水平，应用酶联 免疫吸附法(ELISA)检测血清、BALF中的SP—A水平。 结果： 1．与对照组比较，ALI各组新生大鼠肺组织均可见不同程度的肺组 织充血，注射LPS24h时可见斑片状出血坏死灶。 2．ALI组各时间点的病理切片顺序出现由轻到重的肺间质水肿、炎 性细胞浸润、肺泡出血等改变。 急性肺损伤新生大鼠肺上皮细胞内钙离子与肺表面活性蛋白A变化的研究 (PO．05)，4h时达高峰，随后有所下降。 4．ALI组的肺上皮细胞[Ca2+]i随着病程的进展呈逐渐升高的趋势， 之后虽略有下降，但仍明显高于对照组(PO．05)。 5．ALI组血清SP-A水平在1h已明显高于对照组(PO．05)，8h时 达高峰值，之后虽略有下降，但仍明显高于对照组(PO．05)。 统计学意义(PO．05)。 结论： 1．新生大鼠注射LPS后，肺组织W／D比值升高，病理切片可见肺 间质水肿、炎性细胞浸润、肺泡出血等，均符合ALI改变，说 明采用LPS复制ALI动物模型是成功的。 2．肺上皮细胞胞浆内钙超载是导致ALI肺上皮细胞变性坏死的重 要机制。 3．ALI新生大鼠SP-A的变化，可导致PS各组分比例的改变，在 ALI发病机制中发挥重要作用。 4．ALI发病初期，血清SP-A水平即可出现显著升高，反映了肺泡 上皮细胞的损伤和肺毛细血管通透性的增高。因此，检测血清 SP-A水平可作为ALI早期诊断的指标。 关键词 急性肺损伤；钙离子；肺表面活性蛋白一A；内毒素；新 生大鼠 急性肺损伤新生大鼠肺上皮细胞内钙离子与肺表面活性蛋白A变化的研究 of icCalciumandSurfactantProtein ChangesCytosol AAfterAcute inNeonatalRats LungInjury Fan Postgraduate：Weitang Tutor：Prof．ZhouXi aoguang ABSTRACT Objective InthiS aimiSto of study，the investigatechangescytosolic calciumandsurfactant A (SP—A)afterendotoxin protein 1 nducedacute i nneonatal ipopolysaccharide(LPS)i lungnjury(ALI)i ratS． Methods 64neonatalratSwere diVidedintocontroland7